【摘 要】
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目的:为了解新疆某规模化羊场羊支原体肺炎的感染情况,本研究拟对该规模化羊场进行羊支原体肺炎的流行病学调查,分离病原并分析对药物和对消毒剂的敏感性,在此基础上,探索以疫苗免疫为主的防控方案,以期为该规模化羊场羊支原体肺炎的防控提供参考。方法:(1)现场流行病学调查。实地考察羊场规模,羊群生产状况,对羊呼吸道疾病及羊支原体肺炎的发病情况进行统计分析。(2)血清学流行病学调查。通过正向间接血凝试验(IH
【基金项目】
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兵团重点领域科技攻关计划(2021AB014);
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目的:为了解新疆某规模化羊场羊支原体肺炎的感染情况,本研究拟对该规模化羊场进行羊支原体肺炎的流行病学调查,分离病原并分析对药物和对消毒剂的敏感性,在此基础上,探索以疫苗免疫为主的防控方案,以期为该规模化羊场羊支原体肺炎的防控提供参考。方法:(1)现场流行病学调查。实地考察羊场规模,羊群生产状况,对羊呼吸道疾病及羊支原体肺炎的发病情况进行统计分析。(2)血清学流行病学调查。通过正向间接血凝试验(IHA)对该羊场不同阶段和不同品种的羊群,进行绵羊肺炎支原体(Mo)、支原体山羊肺炎亚种(Mccp)血清抗体检测分析。(3)分子流行病学调查。对采集的病料,采用绵羊肺炎支原体、丝状支原体丝状亚种、山羊支原体丝状亚种、支原体山羊肺炎亚种、精氨酸支原体等特异性引物,通过PCR技术进行检测。选取部分阳性样品进行基因序列测定,分析其分子特性。(4)Mo的分离及部分特性分析。对阳性病料进行病原分离培养,对分离株的16S r RNA及P30基因进行扩增、测序,利用生物信息学软件对测序结果进行分析并构建系统进化树;选取13种比较常见的抗生素,采用微量稀释法,测定最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);选取酚类、季铵盐类、含氯类等5种常见环境消毒剂用分光光度法对其进行敏感性分析。(5)免疫方案的初步制订。在流行病学调查的基础上,针对性选择商品化疫苗,采用正向间接血凝方法对免疫后的抗体消长进行测定及分析。结果:(1)该羊场管理水平相对落后。2020年12月起该羊场的呼吸系统疾病、羔羊的死亡数量均呈现出上升的趋势。羊只的发病大多数集中于12月份至次年的4月份。该场31-45日龄及46-60日龄的羔羊是呼吸系统疾病的高发日龄段,发病品种以湖羊居多。(2)血清学调查结果:Mo的平均阳性率为50.42%;其中阳性率最高的品种是湖羊高达79.17%;阳性率最高的阶段为未断奶羔羊,阳性率达75.00%。另外有部分血清同时检出Mo和Mccp的抗体。(3)分子流行病学调查:该场支原体的总体阳性率为50.49%,Mo的阳性率为43.69%,Ma的阳性率为6.80%;湖羊Mo的感染率最高为54.28%,样品Mo.10与福建农业科学院从山羊体内的分离株FJ-SM(Mycoplasma ovipneumoniae strain FJ-SM.KU870650.1)亲缘性最高,样品Mo.9与中国农业科学院兰州兽医研究所分离株Mo GH3-3株的亲缘性最近,其他测序株单独成一个分支;精氨酸支原体样本Ma6与C1株(HQ661823.1)的亲缘性最近,与G230株(NR_041743.1)也具有一定亲缘性。(4)Mo的分离及部分特性分析:成功分离2株Mo,命名为HR-1、HR-2株;同源性表明分离株与Mo Y98的同源性高达98%,外膜蛋白P30基因存在部分碱基缺失或变异;HR-1对盐酸环丙沙星、阿奇霉素等药物敏感,HR-2对盐酸环丙沙星、阿奇霉素、强力霉素等药物敏感;消毒效果表明,氢氧化钠的作用效果要优于其他几种消毒剂。(5)免疫方案的探索:选择山羊支原体灭活苗(Mo GH3-3+M87-1株),首次免疫保护期可达4个月,2免保护期可达6个月。结论:该规模化羊场羊支原体肺炎的流行比较严重,绵羊肺炎支原体为主要流行菌株,选择山羊支原体灭活苗(Mo GH3-3+M87-1株),首次免疫保护期可达4个月,2免保护期可达6个月。
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