【摘 要】
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蛋白质间的相互作用存在于机体每个细胞的生命活动过程中，它们控制着大量的细胞活性事件，是生命活动的基础，因此对生命活动过程中的蛋白质相互作的研究有助于揭示生命过程的许多
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蛋白质间的相互作用存在于机体每个细胞的生命活动过程中，它们控制着大量的细胞活性事件，是生命活动的基础，因此对生命活动过程中的蛋白质相互作的研究有助于揭示生命过程的许多本质问题。而在当前蛋白质互作研究方法中，酵母双杂交系统因其检测的是真核酵母细胞内的相互作用而被广泛应用。 ZBTB蛋白家族是真核生物中普遍存在的转录因子，具有C2H2 Küppel锌指基序和BTB/POZ结构域，在细胞增殖、分化、凋亡和功能调节等生物学过程中发挥着重要作用。本课题前期已根据数据库序列信息通过RT-PCR技术克隆得到ZBTB家族成员ZBTB8A、ZBTB6，并对ZBTB8A、ZBTB6进行了初步探究。本课题利用酵母双杂交技术在人胎脑文库中筛选与 ZBTB8A互作的蛋白,共筛选得到34种与之互作的新蛋白，并通过哺乳动物细胞 pull-down实验对其中一种蛋白质 XPA与ZBTB8A的相互作用进行了进一步的验证。 同时，我们还利用酵母双杂交技术在人胎脑文库中，对ZBTB6互作蛋白进行了初步筛选，本课题成功构建了钓饵质粒pGBKT7-ZBTB6，并通过了毒性和自激活检测；完成了胎脑文库的扩增；通过酵母双杂交技术SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/+X-α-Gal平板初步筛选得到186例阳性克隆，为后续研究奠定了基础。
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