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鸡源大肠杆菌是兽医临床感染性疾病中最常见的病原菌。其血清型繁多,菌间免疫保护较差,导致了该病对抗生素治疗的依赖,但随着兽医临床对抗生素的不合理使用,使鸡源大肠杆菌逐渐出现了耐药株,不仅给控制和治疗疾病带来困难,而且加剧了抗生素在禽肉制品中的残留,严重的危害动物食品安全。为此,本实验拟根据大肠杆菌的多重耐药机制,筛选出能降低或消除鸡源大肠杆菌耐药性的中草药,并对其机理进行初步探讨。1.大肠杆菌中草药耐药抑制剂的筛选分别采用水提法及醇提法制备五十味中草药药液,进一步用棋盘法以临床分离的1株鸡源多重耐药大肠杆菌为受试菌,对与环丙沙星联合应用后具有相加或协同作用的中草药进行筛选。结果表明,车前子、女贞子、龙胆草及苦参的醇提物与环丙沙星联合应用后对鸡源多重耐药大肠杆菌具有相加作用。2.四味中草药醇提物对大肠杆菌耐药质粒及药物蓄积的影响研究采用环丙沙星蓄积动力学与外排动力学试验检测四味中草药对大肠杆菌药物外排的影响,结果表明,车前子醇提取物对环丙沙星的外排具有一定的抑制作用。此外,本研究采用碱裂解法分别对四味中草药醇提物作用前后的大肠杆菌(J、024、018)进行质粒提取,结果显示四味中草药均不能消除大肠杆菌的耐药质粒,只有车前子醇提取物在一定程度上抑制了大肠杆菌024的耐药质粒的复制。3.车前子抑制大肠杆菌药物外排的活性追踪进一步对车前子醇提取物进行萃取、分离纯化及活性追踪,结果显示,从车前子醇提取物的氯仿萃取物中依次分离得到四部分Fr.A、Fr.B、Fr.C、 Fr.D对大肠杆菌J的药物外排均具有一定的抑制作用,从Fr.D分离得到了Fr.E,经活性检测其对大肠杆菌J的药物外排无抑制作用,结合现代波谱技术鉴定其仍为混合物,并从车前子醇提取物的正丁醇萃取物中分离纯化得到了化合物G,经鉴定其为野树漆苷,活性检测结果表明,其不具有抑制大肠杆菌药物外排的活性。