目的:我们致力于揭示HMGB1(High mobility group box 1)释放与P2x7受体(Purinergic receptor P2Xligand-gated ion channel 7,P2x7R)-晚期糖基化终末产物受体(the receptor for advanced glycation end,RAGE)-Toll 样受体 4(Toll like receptors 4,TLR4)介导的肝脏炎症之间的关系以及木犀草素基于P2x7R-RAGE-TLR4轴调节LPS诱导的肝损伤中NLRP3介导的HMGB1释放的机制。方法:体外模型我们应用LPS/ATP刺激的腹腔巨噬细胞和人肝肿瘤细胞。腹腔巨噬细胞和人肝肿瘤细胞给予不同抑制剂1小时后用LPS/ATP联合刺激处理,并通过蛋白免疫印迹、免疫荧光等实验观察胞内和胞外炎症相关因子的表达情况。LPS诱导小鼠肝损伤的体内模型:对小鼠以1 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg和20 mg/kg的剂量施用LPS,48小时后处死。后续试验选用10 mg/kg剂量施用LPS处理4小时诱导小鼠肝损伤作为模型组,30 mg/kg、60mg/kg两种浓度的木犀草素作为给药组,5 mg/kg的地塞米松作为阳性对照组。收集血液和肝脏,通过H&E染色和免疫组织化学方法观察小鼠肝脏的组织形态学变化,通过蛋白免疫印迹,ELISA,免疫荧光染色等试验方法检测相关炎症因子的表达变化。结果:LPS可以引起—种严重肝脏损伤,其特征是致命性上升,血清丙氨酸转氨酶升高以及免疫细胞(包括中性粒细胞和巨噬细胞)的炎症浸润。另外,在施用LPS后,HMGB1在肝脏细胞的细胞核和细胞质中均有积累,小鼠血清中也有积累。通过调节P2x7R-TLR4-RAGE-NLRP3轴可以抑制LPS/ATP刺激的小鼠腹腔巨噬细胞中HMGB1和IL-1 β的释放。白介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)和白介素36受体拮抗剂(IL-36Ra)也降低了成熟的IL-1 β和HMGB1的释放。LPS/ATP刺激HepG2细胞中HMGB1的产生和释放以及caspase-1的激活,而抑制P2x7R-TLR4-RAGE-NLRP3轴成功地阻止了 HMGB1的释放和caspase-1的激活。木犀草素治疗减少了 LPS诱导的肝损伤,降低血清氨基转移酶升高和炎性细胞浸润。木犀草素预处理抑制巨噬细胞和中性粒细胞的聚集。木犀草素预处理抑制LPS/ATP刺激的HepG2细胞中HMGB1的产生和释放以及caspase-1的激活。结论:总体而言,P2x7R-TLR4-RAGE-NLRP3轴可能通过调节巨噬细胞和肝细胞中HMGB1的释放,从而参与LPS相关的肝炎的调节。木犀草素基于P2x7R-RAGE-TLR4轴来调节HMGB1的释放,以减少LPS引起的肝脏炎症。