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目的通过体内动物实验探讨赖氨大黄酸(RHL)抗大鼠胆汁淤积性肝纤维化的具体分子机制。于此同时,体外培养人肝星形细胞(HSC)中的LX-2细胞株,探讨RHL抑制HSC活化、增殖的具体作用机制。为RHL治疗胆汁淤积性肝纤维化提供实验依据。方法1)体内动物实验:(1)将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、赖氨酸组、35 mg·kg-1及70 mg·kg-1RHL组,每组6只,胆总管结扎(BDL)手术制备胆汁淤积性肝纤维化动物模型。(2)进行HE染色,镜下观察各组大鼠肝脏组织病理学改变;Masson染色观察各组大鼠肝脏组织纤维化程度。(3)应用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测各组大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3 m RNA的相对表达量。(4)采用Western blotting方法,检测各组大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3的蛋白相对表达量。2)体外细胞实验:(1)体外培养HSC中的LX-2细胞株,分成四个实验组,分别为对照组、RHL三个剂量组(50、100和150μmol·l-1)。(2)用流式细胞术方法检测各实验组LX-2细胞的细胞凋亡及细胞周期情况。(3)免疫组织化学检测Smad2和Smad3在各实验组LX-2细胞中的表达情况。(4)应用q RT-PCR检测各实验中Smad2、Smad3 m RNA的相对表达。(5)采用Western blotting方法,检测各实验组LX-2细胞中Smad2、Smad3蛋白相对表达量。结果1)体内动物实验:(1)病理学检查结果可见,与假手术组比较,模型组大鼠肝脏组织中肝小叶结构大量被破坏,汇管区显著增生并伴纤维大量增生;与模型组比较,RHL组大鼠肝脏组织中的肝脏小叶结构较为完整,结构损伤轻微,胆管周围轻度增生,纤维堆积较少且不明显。动物模型建立成功。(2)q RT-PCR和Western blotting结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3 m RNA和蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,RHL组大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3 m RNA和蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2)体外细胞实验:(1)流式细胞术检测结果显示,与对照组比较,RHL组LX-2细胞GO/1期细胞比例明显升高,S期细胞比例明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)免疫组织化学染色结果显示Smad2和Smad3在LX-2细胞胞浆中表达,与对照组相比,RHL组细胞的表达量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)q RT-PCR和Western blotting结果显示,与对照组比较,RHL组处理过得LX-2细胞中Smad2、Smad3 m RNA和蛋白表达水平下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1)RHL可能是通过抑制TGF-β1/Smads信号通路的传导,达到抗纤维化的作用。2)RHL可能是通过促进LX-2细胞的凋亡,达到抑制LX-2细胞增殖的作用。3)RHL可能是通过抑制TGF-β1/Smads信号通路转导,达到抑制HSC细胞活化的作用。