烟粉虱Bemisia tabaci Gennadius是世界范围内的重要经济害虫,研究表明单一防治方法难以获得良好控制效果,而化学防治又会带来诸多例如环境污染、食品安全等问题,目前生物防治是治理烟粉虱的一种有效手段。其中丽蚜小蜂Encarsia formosa Gahan是烟粉虱重要的寄生蜂。丽蚜小蜂的生殖方式为孤雌产雌,是体内共生菌Wolbachia所诱导的。Wolbachia是一类随母性遗传的专性内寄生菌,在寄生蜂种群中有着广泛的分布。本文设计一种方便实用的养虫装置,并利用此装置探讨了丽蚜小蜂寄生对烟粉虱生长发育的影响;通过解剖不同发育阶段的丽蚜小蜂,观察了对应的卵巢小管形态,统计分析了丽蚜小蜂卵巢小管数量的变化情况;用荧光原位杂交(FISH)技术观察了Wolbachia在丽蚜小蜂雌成蜂体内的分布;用相对定量PCR方法,建立抗生素浓度和清除Wolbachia效果之间的定量关系;利用盐酸四环素连续处理丽蚜小蜂,分析对小蜂产生的影响:子代性比、子代蜂的卵巢管数量及卵巢小管的形态变化等。得到实验结果如下:(1)比较了未被寄生和被寄生烟粉虱若虫的个体大小及各龄期的死亡率。结果发现,2龄、3龄和4龄若虫被寄生后,烟粉虱若虫均能继续发育。对于同一龄期的若虫,丽蚜小蜂偏向于选择较大的个体寄生,2龄和3龄被寄生若虫发育后期个体也比被寄生个体大,但4龄时被寄生的个体在发育后期略小于未被寄生个体,显示丽蚜小蜂对不同龄期若虫的生长发育影响不同。供试2龄若虫的死亡率为61.11%,显著高于3龄和4龄若虫的死亡率,以4龄若虫为寄生对象时,获得的黑蛹率最高,为 48.39%。(2)丽蚜小蜂从卵到成虫的总发育历期为15.2±0.1 d,可分成卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫五个阶段;试验中共解剖1097头丽蚜小蜂成蜂,得出卵巢小管数量有4种对称情况:6根(3+3)、8根(4+4)、10根(5+5)和12根(6+6)以及2种不对称情况:7根(4+3)和9根(5+4);其中数量为8根的个体占89.97%;通过对成虫前各虫态解剖发现丽蚜小蜂的卵巢小管在预蛹期形态可见,但数量难以辨识,在蛹期数量可辨。(3)用荧光原位杂交技术(Fluorescence in Situ Hybridization,FISH)对丽蚜小蜂体内的Wolbachia进行定位,发现Wolbachia主要分布在丽蚜小蜂的腹部。使用相对定量PCR的方法,建立抗生素浓度(5,10 mg/ml)和Wolbachia清除效果之间的定量关系,结果表明当代(F0代)不同浓度盐酸四环素清除效果之间无明显差异,10 mg/ml抗生素处理后F1代Wolbachia含量明显低于F0代。(4)试验中用含10 mg/ml盐酸四环素的蔗糖水饲喂成蜂24 h,连续处理4代。PCR结果显示丽蚜小蜂体内的Wolbachia未被完全清除,子代蜂中出现雄蜂且雄性比例明显高于雌性,在F2代达到最高为94.40%,部分雄性后代感染Wolbachia;解剖F4代蜂,卵巢小管数量与为8根,但宽度与对照相比明显变小。