渐狭蜡蚧菌对西花蓟马的侵染及对生殖的影响

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西花蓟马Frankliniella occidentalis是重要的世界性害虫,该虫繁殖力高、世代周期短且适应性强,严重危害蔬菜、花卉和果树等经济作物。蜡蚧菌Lecanicillium是重要的虫生真菌之一,寄主范围广、致病力高及对环境安全,在西花蓟马的绿色治理中占有重要地位。本课题组前期已从多株蜡蚧菌中初步筛选出对不同虫态西花蓟马均具较高致病力的渐狭蜡蚧菌L.attenuatum,为进一步掌握渐狭蜡蚧菌对西花蓟马的侵染及生殖的影响,本论文开展了渐狭蜡蚧菌对西花蓟马的侵染过程、单次及连续3代使用渐狭蜡蚧菌侵染对西花蓟马致病力和亚致死效应的影响、西花蓟马卵巢发育的分级标准、渐狭蜡蚧菌对西花蓟马卵巢发育的影响、渐狭蜡蚧菌对西花蓟马卵黄原蛋白基因表达量和含量的影响等研究。主要结果如下:1渐狭蜡蚧菌对西花蓟马的侵染过程、致病力及亚致死效应利用扫描电镜观察了渐狭蜡蚧菌对西花蓟马雌成虫的侵染过程,结果表明渐狭蜡蚧菌侵染西花蓟马速率较快,分生孢子附着、萌发、穿透体壁和菌丝包被虫体整个过程最快在48 h便能完成。1~24 h渐狭蜡蚧菌分生孢子在西花蓟马的头部、胸部和腹部的侵染速率基本一致,但附着的分生孢子数存在显著差异,其中胸部附着的分生孢子数最多,腹部其次,头部最少。渐狭蜡蚧菌连续处理西花蓟马2龄若虫后,F1代、F2代和F3代2龄若虫7 d累计死亡率分别为64.44%、67.78%和64.44%。存活的2龄若虫羽化为成虫后继续使用渐狭蜡蚧菌处理,F1代、F2代和F3代雌成虫7 d累计死亡率分别为91.11%、92.22%和92.22%,均高于90%。当渐狭蜡蚧菌仅处理F1代西花蓟马2龄若虫时,造成雌成虫产卵量显著减少,寿命显著缩短,存在一定的亚致死效应,且其影响能传递至后代,但随代数逐渐减小;当渐狭蜡蚧菌连续处理西花蓟马2龄若虫后,F2代和F3代产卵量和寿命均显著小于对照,但亚致死效应也逐渐减小。2西花蓟马卵巢发育分级标准及渐狭蜡蚧菌对西花蓟马卵巢发育的影响利用显微镜观察了西花蓟马的雌性内生殖系统及各个时期卵巢的发育情况,结果表明西花蓟马雌性内生殖系统主要由1对卵巢、中输卵管、1对侧输卵管、受精囊及附腺等构成。根据卵巢发育情况,初步建立了西花蓟马卵巢发育分级标准,分别为Ⅰ级:发育初期(0~24 h)、Ⅱ级:卵黄沉积期(24 h~2 d)、Ⅲ级:成熟待产期(2~3 d)、Ⅳ级:产卵期(3~21 d)和Ⅴ级:产卵末期(21 d~死亡)。在此基础上,研究了渐狭蜡蚧菌对西花蓟马卵巢发育的影响,结果表明渐狭蜡蚧菌处理西花蓟马2龄若虫后,其雌成虫卵巢管长度总体上短于对照组,卵巢管内的卵发育明显延缓,第3 d才发现成熟卵,相比对照组延迟1 d,且卵巢提前萎缩,说明渐狭蜡蚧菌处理西花蓟马可影响其卵巢发育和卵子的产出。3渐狭蜡蚧菌对西花蓟马卵黄原蛋白基因表达量及含量的影响研究了渐狭蜡蚧菌处理西花蓟马2龄若虫后,其雌成虫在两性生殖和孤雌生殖下Vg表达量及Vg含量的变化。结果表明渐狭蜡蚧菌只处理F1代西花蓟马2龄若虫时,F1代两性生殖的西花蓟马雌成虫第3 d体内Vg表达量与对照无显著差异,而Vg含量显著上升;F2代Vg表达量显著高于对照,Vg含量与F1代无显著变化;F3代Vg表达量和Vg含量显著下降至对照水平。F1代孤雌生殖的雌成虫Vg表达量无显著变化,Vg含量显著上升;而F2代和F3代孤雌生殖的西花蓟马雌成虫Vg表达量呈显著上升的趋势,Vg含量与F1代无显著变化。当渐狭蜡蚧菌连续处理西花蓟马2龄若虫时,F2代两性生殖的雌成虫Vg表达量显著下降至对照水平,Vg含量与F1代无显著差异,F3代Vg表达量继续维持在对照水平,Vg含量则下降至对照水平;而F2代和F3代孤雌生殖的雌成虫Vg表达量均显著上升,Vg含量则在F2代达到峰值,F3代开始显著下降。表明渐狭蜡蚧菌处理西花蓟马2龄若虫造成西花蓟马雌成虫Vg表达量和Vg含量明显变化,其变化趋势因处理的次数、代数及生殖方式的不同存在一定差异。
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