飞蝗Locusta migratoria,隶属于昆虫纲直翅目Orthoptera、蝗总科Acridoidea,是一种世界性的农业害虫,在我国分布广泛,为害严重。羧酸酯酶能结合进入昆虫体内的有机磷杀虫剂,并将杀虫剂在发挥作用之前阻隔或降解,致杀虫剂失去应有的杀伤作用,从而使昆虫免受杀虫剂的毒性作用。本文从基因水平和蛋白水平对飞蝗羧酸酯酶基因CarE4、CarE9和CarE25进行了研究,探讨了该三个基因的序列特征和蛋白表达特性。本文在飞蝗表达序列标签(ESTs)数据库中搜索羧酸酯酶基因的保守区,经序列拼接整理后得到CarE4的全长序列。据此设计上下游引物扩增CarE4全长序列,分析了该基因的分子特性、蛋白质一级结构和二级结构特征。在获得CarE4全长序列的基础上,本文采用实时荧光定量PCR技术对该基因进行了不同发育阶段和组织部位表达特性研究。结果表明,CarE4在飞蝗各龄期的表达量基本呈先下降后上升的趋势,在胃盲囊中特异表达且表达量较其它组织部位为高。本文对羧酸酯酶基因CarE4、CarE9和CarE25进行了原核表达,构建了三种重组表达载体：pCold TF-CarE4、pGEX-6p-1-CarE9和pET32M-CarE25,探索出这三个基因的最佳诱导表达条件。在此基础上,采用多种方法进行了蛋白纯化,总结出这三种蛋白的最佳纯化方法并得到了目的蛋白的纯品。本文还制备了CarE9蛋白的抗体,利用Western Blot方法检测了CarE9蛋白在飞蝗不同组织部位的表达情况,结果表明其在胃盲囊中有较高的表达量。综上所述,本文从基因和蛋白水平对飞蝗羧酸酯酶基因CarE4、CarE9和CarE25进行了研究,对探索其它羧酸酯酶基因的分子特性有一定的参考价值,也为进一步探讨昆虫体内羧酸酯酶基因的生理功能、结构特点和作用机理提供了基础资料。