单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,简称单增李斯特氏菌)属于李斯特氏菌属(Listeria),是一种人畜共患的病原菌,可引起人和动物的胃肠炎、脑膜炎、败血症和流产等,死亡率可达20～30%。近年来随着冷藏和速冻食品消费量迅速增多,食品中单增李斯特氏菌的潜在危险性也越来越大。单增李斯特氏菌的研究已涵盖其生物学特性、检测技术、致病基因、遗传多样性等诸多方面。由于不同来源的单增李斯特氏菌毒力差异较大,有些菌株致病性很强,而有些菌株毒力较弱甚至无致病性。因此,准确和快速的鉴别食品分离株的毒力已成为目前国内外学者研究的热点之一。本文采集熟肉制品、豆制品、奶及奶制品、蔬菜、水果、速冻食品、水产品、生肉等8类食品共1645份样品,进行单增李斯特氏菌的分离与鉴定。以单增李斯特氏菌相关毒力基因(hly、plcB、inlA、inlB、inlC、inlJ、prfA)设计引物,检测49株单增李斯特氏菌食品分离株中的毒力基因携带率,并进行小鼠毒力实验,分析毒力基因携带率与单增李斯特氏菌毒力的相关性,建立PCR技术鉴别单增李斯特氏菌强毒株和弱毒株或无毒株的方法。实验结果：单增李斯特氏菌的总检出率为3.0%,总检出率相比其他地区偏低。在8类食品样品中,生肉中单增李斯特氏菌的检出率最高,为5.8%,其次是熟肉制品、水产品,检出率分别为3.3%和2.9%。49株分离株中有19株7种毒力基因检测结果均为阳性,7株hly基因阴性,4株plcB基因阴性,4株prfA基因阴性。5株inlA、inlB基因阴性,13株inlC基因阴性,12株inlJ基因阴性,1株inlA、inlB、inlC、inlJ基因均为阴性。4株分离株的毒力与标准菌株ATCC191161E相当,小鼠LD50在1.2×108-6.0×108CFU/mL之间,为强毒株。筛选出弱毒株09-132, LD50为1.7×1011CFU/mL。本研究可得出如下结论：1、ALOA显色培养基无论是从疑似菌检出概率还是总的检出率来说,都是最优的：PALCAM平板适于熟肉制品中单增李斯特氏菌检测；为提高检出率最好使用一种以上的选择性培养基进行分离。2、生禽畜肉、水产品、熟肉制品、速冻食品均受到包括单增李斯特氏菌在内的两种及其以上李斯特氏菌的污染,此结果说明某市存在发生李斯特氏菌食物中毒的潜在危险。3、食品分离株的毒力强弱与血清型无关。生禽肉中单增李斯特氏菌内化素基因(inlA、inlB、inlC、inlJ)阳性率高于生畜肉。内化素基冈(inlA、inlB、inlC、inlJ)的缺失可能是导致菌株毒力降低的原因,而prfA和plcB基因与菌株毒力的相关性较小,inlC可作为区分强毒株和弱毒株的标志基冈。建议：鉴于目前状况,有待于构建单增李斯特氏菌特定毒力基因的缺失株,进行毒力实验,进一步确定特定毒力基因与毒力的相关性,为单增李斯特氏菌病的监控、暴发流行的检测以及追踪污染源提供依据。