论文部分内容阅读
目的： 种植体颈部形成严密的软组织封闭有重要的影响，健康的牙龈组织是形成种植体颈部软组织封闭的基础。为了研究吸烟对种植体颈部软组织封闭的影响，本研究通过观察烟雾冷凝提取液（CSC）和尼古丁对人牙龈成纤维细胞在钛片表面生长情况的影响并检测其IL-6、IL-8以及纤维结合蛋白（FN）的表达，来探讨烟草对种植体根界面破坏的理论机制。 方法： 采用组织块法进行人牙龈成纤维细胞（HGFs）的原代培养，将厚度1mm、直径10mm的钛片用金相砂纸逐级打磨，HGFs接种到打磨好的钛片上， MTT法测定细胞在钛片表面贴附数量，24小时后,荧光倒置显微镜、激光扫描共聚焦显微镜观察拍片，分析钛片表面细胞形态、铺展的变化。RT-PCR检测FN的mRNA水平。PCR检测炎性因子IL-6以及IL-8的表达量。ELISA法检测CSC和尼古丁在钛片上对HGFs合成Fn的影响 结果： 1.CSC在浓度为250μg/ml时会导致细胞死亡，而尼古丁只需要16μg/ml即可，但 CSC在浓度为50μg/ml时会适度诱导细胞活力。 2.CSC在浓度为50μg/ml和尼古丁浓度为3.21μg/ml时都能刺激细胞迁移， CSC在150μg/ml时抑制细胞迁移，但相当浓度的尼古丁（换算成相同浓度的9.6μg/ml）没有此效果。CSC相比较尼古丁而言，更加能够抑制α-平滑肌动蛋白的产生。 3. CSC可以抑制细胞迁移和存活，并在高浓度时抑制这些细胞的应答，此外CSC可能会干扰成肌纤维母细胞的分化，CSC可显著改变牙龈间叶细胞活力，迁移和成纤维细胞的分化，而去除刺激因素时，细胞在培养皿表现与正常体内相同。 4. CSC及尼古丁均可抑制牙龈成纤维细胞在钛片表面的粘附，且随着CSC及尼古丁浓度逐渐升高,细胞在钛片表面粘附的数目逐渐减少。 5.在CSC和尼古丁的刺激下，抑制HGFs增殖及合成Fn，并且牙龈成纤维细胞对炎性因子（IL-6、IL-8）的表达量明显増加。 结论： 尼古丁能抑制人HGFs的增殖。尼古丁和CSC抑制HGFs合成Fn，随着两种刺激物浓度的增加，Fn合成量逐渐减少。由此说明一定量浓度的尼古丁影响HGFs的生长，并不易附着于根面，加重种植体周围炎，进一步影响牙周新附着的形成。