雌激素干扰物（Estrogenic Disrupting Compounds,EDCs）是一类模拟或者阻碍雌激素作用,干扰生物体内分泌系统功能,影响生殖发育,破坏机体正常激素代谢的一类外源性物质。其在环境中广泛存在,可通过食物链进行富集,从而在食品中产生残留,对人体健康造成危害。因此建立EDCs的高效、灵敏、准确的检测方法具有重要意义。目前对EDCs的检测方法主要是生物学检测方法和化学检测方法,生物学检测方法主要用于初步筛选;化学检测方法主要是利用高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）、气相色谱等大型仪器实现定性定量检测,此类方法可以准确测定低浓度的雌激素含量。但由于食品基质比较复杂,基质中存在的大量干扰物会对检测结果的准确性造成影响。因此利用仪器进行检测时,需要配套采用适宜的前处理方法。其中应用最广泛的前处理方法为固相萃取（Solid Phase Extraction,SPE）方法。目前常用的SPE以非特异性吸附的硅胶柱为主;或者采用抗体或分子印迹作为特异性识别材料的SPE方法。其中采用硅胶等作为填料的SPE方法,与目标待测物的作用为非特异性吸附,同时对于其他性质类似的干扰物也会存在一定程度的保留,无法实现对目标待测物特异性的有效净化。而采用抗体、分子印迹聚合物等作为SPE填料的识别分子可实现对目标待测物的特异性结合,但此类识别分子的制备原理决定了其特异性识别只能局限于有限几种EDCs,限制了方法的推广应用。EDCs大多通过与雌激素受体（Estrogen Receptor,ER）结合从而发挥对内分泌系统的干扰作用,因此采用ER作为SPE填料的识别材料既可有效避免与基质中其他杂质的非特异性结合,还可实现对所有EDCs的特异性识别。但ER非常不稳定,极易失活,在用于制备SPE柱时,若采用化学方法交联于SPE填料上则会丧失大部分活性,对EDCs的富集净化效果差。本论文建立了一种基于雌激素受体结合元件（Estrogen Receptor response Element,ERE）的EDCs固相萃取方法,利用ERE保持ER的生物学活性,从而使EDCs富集净化效果得到显著提高,与HPLC联用可以对EDCs进行定性定量检测。论文建立的基于ERE的EDCs固相萃取方法具有选择性强,富集净化效果好、操作简单等优点。论文主要包括四个部分,内容如下:绪论分别对EDCs、ER和ERE以及三者之间的相互作用机制进行了概述,介绍了EDCs的检测方法及预处理方法、SPE方法的应用及与HPLC联用的研究进展、ER作为识别材料的检测方法的应用及其研究进展。重点对EDCs、ER和ERE之间的作用机制及ER作为识别材料在EDCs的检测中的应用进行了综述。第二章建立了一种基于ERE的EDCs固相萃取方法,利用ERE作为ER和硅胶之间的连接单元,在最大限度保持ER活性的基础上,实现了ER对EDCs的特异性吸附,利用HPLC对EDCs进行定性定量检测。实验采用牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin,BSA）封闭硅胶的大分子位点,消除硅胶对ER的非特异性吸附,使得ER能够特异性结合ERE,并利用考马斯亮蓝测蛋白法建立标准曲线计算ER的结合情况。利用三苯甲胺封闭硅胶未反应的羧基等小分子结合位点,使得ER特异性吸附EDCs。论文对ER非特异性吸附的消除、ERE与ER的孵育时间及EDCs非特异性吸附的消除等进行了优化。最佳实验条件如下:羧基化硅胶活化后,与ERE震荡结合时间为2 h,然后采用0.3 m L 3%BSA封闭硅胶上的蛋白等大分子结合位点,ER与ERE孵育结合时间为2 h,再用0.3 m L 0.03 mg·m L-1的三苯甲胺封闭硅胶的未反应的羧基等小分子位点,将偶联有ERE和ER的硅胶转移到SPE柱中,最后与HPLC联用实现对EDCs的定性定量检测。本章主要建立了双酚A（Bisphenol A,BPA）、雌二醇（Estradiol,E2）、己烯雌酚（Diethylstilbestrol,DES）三种EDCs的SPE方法。以液态乳为样品基质代表对方法进行了准确性考察,样品加标回收率在84.1～113.6%范围内。第三章将第二章建立的基于ERE的EDCs固相萃取方法应用于不同品牌,不同批次的液态乳、发酵乳及乳粉中的EDCs检测,所有品牌所有批次的液态乳、发酵乳及乳粉中均未检测到E2和DES的残留。仅一个品牌部分液态乳中检测到BPA残留,但残留量低于每日可耐受摄入量(4μg·kg-1·bw·day-1),因此消费者可放心饮用。第四章对所建立的基于ERE的EDCs固相萃取方法进行了总结,并对液态乳、发酵乳及乳粉中的EDCs检测结果进行了分析,与传统方法相比,该方法具有可以特异性识别多种EDCs,富集净化效果好、操作简单等优点。