灌胃吡喹酮在中华草龟体内的药代动力学与组织病理学研究

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为了给吡喹酮在龟鳖临床驱虫的安全有效使用提供科学指导,本试验针对性的研究吡喹酮在中华草龟体内的药物代谢动力学特征、不良反应评价以及组织毒理学病变。试验共分为4组,每组分别3只健康的成年中华草龟作为平行。研究灌胃吡喹酮在中华草龟体内的吸收代谢规律以及不同性别、不同剂量、不同给药次数对吡喹酮在中华草龟体内的药物代谢动力学特征的影响。同时,评估灌胃吡喹酮对中华草龟的安全性,针对中毒程度设计不良反应等级,从而进行不良反应评价。发现濒死或刚死的中毒龟立即解剖与观察,分离组织器官,采用石蜡切片,进行HE染色,显微镜下进行组织病理学检查。药代动力学研究结果显示,灌胃吡喹酮在中华草龟体内的药时数据均符合一室开放模型,并出现了双峰效应。主要药动学参数:试验Ⅰ组(30 mg/kg b.w,单次,雌性)的Tmax=15.949 h、Cmax=0.615μg/mL、AUC=26.664μg/mL·h;试验Ⅱ组(30 mg/kg b.w,单次,雄性)的Tmax=74.857 h、Cmax=0.592μg/mL、AUC=123.427μg/mL·h;试验Ⅲ组(15 mg/kg b.w,单次,雄性)的Tmax=75.523 h、Cmax=0.234μg/mL、AUC=48.760μg/mL·h;试验Ⅳ组(10 mg/kg b.w,3次,雌性)的Tmax=14.161 h、Cmax=0.303μg/mL、AUC=15.726μg/mL·h。雄性中华草龟的达峰时间Tmax、吸收速率Ka、消除速率Kel均小于雌性草龟;灌胃吡喹酮在中华草龟体内的Cmax、AUC随剂量增加而增大,但达峰时间、吸收速率与消除速率基本不变。吡喹酮经灌胃给药在中华草龟体内的达峰时间Tmax只与性别有关,而与剂量、给药次数无关,雌性草龟对吡喹酮的吸收与代谢速率均大于雄龟;总给药剂量相同时,多次给药组的Ka、MRT大于比单次给药组,Kel较小,说明合理间隔分多次给药能够提高吸收水平,延长有效血药浓度时间。不良反应评价结果为,试验Ⅰ-Ⅲ组均出现了强烈的不良反应,症状表现基本一致,主要特征表现为采食能力下降,后肢运动障碍,精神状态变差,严重者甚至死亡。试验Ⅰ组各试验龟的评价等级分别为4、1、3级,试验Ⅱ组分别为4、2、3级,试验Ⅲ组分别为4、2、4级,试验Ⅳ组则分别为1、0、0级,仅一只在给药后第8d才出现1级不良反应(不排除其他致病因素),其余两只无不良反应。解剖学与组织病理学观察结果发现,试验Ⅰ-Ⅲ组中毒龟的肾脏、肝脏等多种器官组织均发生了不同程度和类型的病变,其中以肾组织最为严重,根据各组织器官的中毒病变程度和对生命健康的影响比重,由重到轻依次可排序为:肾组织>肝组织>脾组织、胰组织>心组织、肺组织>胃组织、肠道组织>肌肉组织、脂肪组织。试验Ⅰ-Ⅲ组组织病理变化程度基本相似,但试验Ⅳ组则相对较轻,说明30mg/kg b.w或15mg/kg b.w吡喹酮单次灌胃对中华草龟具有很强的全身性毒性,但按10mg/kg b.w灌胃3次,间隔时间3h,则相对低毒性。本研究首次发现不同性别对药物在中华草龟体内的吸收代谢存在影响,雌龟对吡喹酮的吸收达峰时间约15h,雄龟约74h;首次明确吡喹酮过量会对中华草龟造成强烈的不良反应和全身性组织毒性,但具有一定的可逆性,经过自体修复有可能恢复,雌性草龟的恢复能力强于雄性草龟;龟鳖临床上使用吡喹酮驱虫,推荐单次灌胃剂量为10 mg/kg b.w以下,如果需要提高剂量,可以多次给药,雌龟连续3次以内。
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