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第一部分老年营养不良患者淋巴细胞亚群的特点
目的：营养不良是一种常见的老年综合征，可引起老年人免疫系统功能下降、易患感染性疾病等一系列不良后果，然而目前缺乏对中国老年营养不良患者淋巴细胞亚群变化的研究。本研究旨在系统地描述营养不良对住院老年人群T淋巴细胞亚群及NK细胞相关参数的影响。
方法：对老年患者进行横断面研究。纳入2014年12月至2017年11月在我院老年病房年龄≥65岁的患者，排除肿瘤、传染性疾病、自身免疫病以及使用影响免疫功能药物的患者。采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群所占比值，包括：淋巴细胞占有核细胞比值，T淋巴细胞、NK细胞、NKT淋巴细胞、CD4+辅助性T淋巴细胞(Th)、CD8+抑制/细胞毒性T淋巴细胞(Ts)以及CD4+CD25+CD127dim/-调节性T淋巴细胞(Treg)占淋巴细胞的比值，CD4/CD8比值，初始和记忆性Th细胞、初始和记忆性Ts细胞、表达第二受体(CD28+)的T淋巴细胞、Th细胞及Ts细胞、缺失第二受体(CD28?)的Th细胞及Ts细胞占T淋巴细胞的比值。运用NRS2002量表对所有患者进行营养风险筛查，对有营养风险(评分≥3分)者进行进一步营养评估，根据结果将患者分为营养不良组与营养正常组。收集所有患者的基线资料，包括患病情况、营养相关指标及淋巴细胞亚群参数等，将两组患者进行对比。
结果：本研究共计172例老年患者最终完成了调查，入组患者的平均年龄为80.94±9.02岁(在65-102岁之间)，平均身体质量指数为24.01±3.78kg/m2。患者合并疾病数目平均达7种，平均住院时长达18天。结果显示53例(30.81%)为有营养风险，39例为营养不良，营养不良发生率为22.67%，其中中度营养不良者占8.14%，重度营养不良者占14.53%。所研究人群的营养风险、营养不良和重度营养不良的发生率均随年龄增长而升高(P＜0.05)。与营养正常组患者相比，营养不良组患者年龄更大(P＜0.001)、身体质量指数更低(P＜0.001)且住院时间更长(P=0.004)，呼吸道感染及慢性阻塞性肺疾病的患病率更高(P＜0.001,P=0.002)，高血压的患病率更低(P=0.019)，但两组患者在性别分布及合并疾病数目方面无统计学差异。研究发现性别对部分淋巴细胞亚群的影响，女性的淋巴细胞、CD4+CD28+T细胞比值更高，而男性的NK细胞更高(P＜0.05)。营养不良患者的Th淋巴细胞、CD4/CD8比值、Treg、初始Th细胞、CD3+CD28+T细胞、CD4+CD28+T细胞、CD8+CD28+T细胞的值更低，而记忆性Ts细胞、CD8+CD28?T细胞的比值更高，具有统计学差异(P＜0.05)。
结论：在所研究的老年住院患者中营养不良发生率较高，且随着年龄的增长，研究人群营养风险、营养不良及重度营养不良的发生率逐渐上升。性别对淋巴细胞、CD4+CD28+T细胞以及NK细胞的影响提示这些亚群的变化可能跟女性的长寿相关。营养不良患者Th细胞、CD4/CD8比值、Treg等亚群的变化提示其可能在营养不良及相关并发症的发生发展中起了关键的作用，对上述这些变化亚群的干预可能可以作为营养不良治疗的靶点。
第二部分老年患者免疫风险表型的研究
目的：免疫风险表型(IRP：immunological risk phenotypes)是一组评价机体免疫功能的指标，可以预测疾病的发生。老年人常伴有免疫功能的下降且常合并营养不良，影响其生活质量及预后。本研究旨在发现老年患者的IRP，从而为延缓免疫衰老、营养与免疫干预等提供依据。
方法：对老年患者进行前瞻性观察队列研究。纳入2014年12月至2017年11月在我院老年病房年龄≥65岁的患者，排除肿瘤、传染性疾病、自身免疫病以及使用影响免疫功能药物的患者。在基线时收集反映营养状况和免疫功能的临床资料和实验室参数以及血清巨细胞病毒抗体。采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群所占比值，包括：淋巴细胞占有核细胞比值，T淋巴细胞、NK细胞、NKT淋巴细胞、Th细胞、Ts细胞以及Treg占淋巴细胞的比值，CD4/CD8比值，初始和记忆性Th细胞、初始和记忆性Th细胞、表达第二受体(CD28+)的T淋巴细胞、Th细胞及Ts细胞、缺失第二受体(CD28?)的Th及Ts细胞占T淋巴细胞的比值。对所有患者进行为期2年的随访，随访终点事件为全因死亡。对比死亡组与存活组患者之间的营养与免疫指标的差异，并通过ROC曲线及生存分析判断对全因死亡的预测价值。
结果：对入组患者进行了为期24个月的电话随访和临床随访，达到随访终点者为170例。患者基线平均年龄为80.84±9.02岁，其中男性133例(占78.2%)，随访期间发生全因死亡的人数为34例。存活及死亡患者在年龄、BMI及住院时长上有显著差异，死亡组患者年龄更大(P＜0.001)、BMI值更低(P＜0.001)、住院时间更长(P＜0.05)。死亡组患者合并呼吸道感染、慢性阻塞性肺疾病的比例更高，而存活组患者患消化系统疾病比例较高(P＜0.05)。对患者进行营养筛查结果显示，死亡组患者NRS2002评分≥3分者高达79.4%，其营养状况更差(P＜0.001)。几乎所有患者既往感染过巨细胞病毒(97.7%)，未发现现状感染者。通过对生物学标记物的分析，发现可能与全因死亡相关的有：低血清白蛋白、前白蛋白水平，低Th细胞、CD4/CD8比值、初始及记忆性Th细胞、CD3+CD28+T细胞、CD4+CD28+T细胞(P＜0.05)，高Ts细胞、初始及记忆性Ts细胞以及CD8+CD28?T细胞(P＜0.05)。以CD4/CD8比值分组，发现免疫风险组的患者男性比重更大(86.89%vs 73.39%)，且年龄更大(82.72±8.64vs79.78±9.10)，BMI值更低(22.91±3.53vs24.44±3.99)(P<0.05)；NKT淋巴细胞以及与CD8相关的淋巴细胞亚群升高，包括初始Ts细胞、记忆性Ts细胞、CD8+CD28+T淋巴细胞以及CD8+CD28?T淋巴细胞(P<0.05)；CD3+CD28+T淋巴细胞以及多个与CD4相关的淋巴细胞亚群降低，包括Treg、初始Th细胞、记忆性Th细胞以及CD4+CD28+T淋巴细胞(P<0.05)；CD4+CD28?T细胞也降低，但无统计学差异。对全因死亡的预测中，CD8+CD28?T细胞预测效果最佳(AUC=0.706)，且具有较高的灵敏度(0.912)；其次为初始Ts细胞(AUC=0.683)，但其灵敏度和特异度不高。生存分析结果显示，CD4/CD8＜1(P=0.009)、淋巴细胞(P=0.043)、Th细胞(P=0.030)、Ts细胞(P=0.035)、初始Ts细胞(P=0.010)、CD3+CD28+T细胞(P=0.002)、CD4+CD28+T细胞(P=0.001)以及CD8+CD28?T细胞(P=0.004)可以预测死亡。
结论：本研究对老年患者的免疫风险表型进行了探索，结果提示除CD4/CD8＜1外，CD8+CD28?T细胞、初始Ts细胞可能是较好的IRP指标，而淋巴细胞、Th细胞、Ts细胞、CD3+CD28+T细胞以及CD4+CD28+T细胞也可用作IRP。男性、高龄及营养不良与免疫风险明显相关。临床上通过相关淋巴细胞亚群的检测以及营养不良的筛查，可对有免疫风险的人群早发现、早诊断、早治疗，改善患者预后。
第三部分老年营养不良患者调节性T细胞的变化
目的：老年人营养不良的发生率较高，容易导致许多不良后果，尤其是各种感染。目前认为这是由于营养不良引起的免疫力下降而导致的，但具体机制尚未完全明确。调节性T细胞是人体重要的免疫细胞，在抑制炎性反应等方面发挥重要作用。本研究旨在探讨调节性T细胞在老年营养不良患者中的数目及功能的变化。
方法：对前期2014年12月至2017年11月期间收集的172例老年住院患者数据进行分析，将患者分为营养不良组与营养正常组，分析两组间调节性T细胞占T淋巴细胞的比例的差异。纳入2019年4月至11月在我院老年病房年龄≥65岁的患者营养不良患者6例，以及性别、年龄相匹配的营养正常患者6例，作为对照组。两组患者均排除：肿瘤、传染性疾病、自身免疫病以及使用激素、免疫抑制剂等影响免疫功能药物的患者。收集患者的一般资料及血清细胞因子IL-6、IL-10及TNF-α的表达情况；采集患者外周血，用磁珠分选法分选出调节性T细胞，采用RT-PCR检测抗凋亡基因Bcl-2、MCL-1及凋亡基因Caspase-3、BID、BAX的表达。对比两组患者调节性T细胞数目、细胞因子表达水平以及凋亡、抗凋亡基因表达的差异。
结果：研究发现，营养不良组外周血调节性T细胞占T淋巴细胞的比例以及调节性T细胞的数目均低于营养正常组(P<0.05)。营养不良患者IL-6及IL-10的分泌高于正常参考值，并显著高于营养正常组(P<0.001及P<0.01)。与正常对照组相比，调节性T细胞的抗凋亡基因Bcl-2、MCL-1在营养不良患者中表达更低(P<0.001)。此外，促凋亡基因Caspase-3、BAX在营养不良患者中的表达更高(P<0.01)，而促凋亡基因BID在两组间无明显统计学差异。
结论：调节性T细胞可能在营养不良引起的免疫功能下降中起着重要作用。营养不良患者外周血调节性T细胞的数目及比值降低，可能与其抗凋亡基因Bcl-2和MCL-1的表达降低、凋亡基因Caspase-3、BAX的表达升高相关。营养不良患者细胞因子IL-6、IL-10的水平增高表明其体内促炎与抗炎过程的相互作用，与调节性T细胞的数目和功能密切相关。通过对调节性T细胞的干预可能可以成为营养不良及其并发症的治疗靶点。
目的：营养不良是一种常见的老年综合征，可引起老年人免疫系统功能下降、易患感染性疾病等一系列不良后果，然而目前缺乏对中国老年营养不良患者淋巴细胞亚群变化的研究。本研究旨在系统地描述营养不良对住院老年人群T淋巴细胞亚群及NK细胞相关参数的影响。
方法：对老年患者进行横断面研究。纳入2014年12月至2017年11月在我院老年病房年龄≥65岁的患者，排除肿瘤、传染性疾病、自身免疫病以及使用影响免疫功能药物的患者。采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群所占比值，包括：淋巴细胞占有核细胞比值，T淋巴细胞、NK细胞、NKT淋巴细胞、CD4+辅助性T淋巴细胞(Th)、CD8+抑制/细胞毒性T淋巴细胞(Ts)以及CD4+CD25+CD127dim/-调节性T淋巴细胞(Treg)占淋巴细胞的比值，CD4/CD8比值，初始和记忆性Th细胞、初始和记忆性Ts细胞、表达第二受体(CD28+)的T淋巴细胞、Th细胞及Ts细胞、缺失第二受体(CD28?)的Th细胞及Ts细胞占T淋巴细胞的比值。运用NRS2002量表对所有患者进行营养风险筛查，对有营养风险(评分≥3分)者进行进一步营养评估，根据结果将患者分为营养不良组与营养正常组。收集所有患者的基线资料，包括患病情况、营养相关指标及淋巴细胞亚群参数等，将两组患者进行对比。
结果：本研究共计172例老年患者最终完成了调查，入组患者的平均年龄为80.94±9.02岁(在65-102岁之间)，平均身体质量指数为24.01±3.78kg/m2。患者合并疾病数目平均达7种，平均住院时长达18天。结果显示53例(30.81%)为有营养风险，39例为营养不良，营养不良发生率为22.67%，其中中度营养不良者占8.14%，重度营养不良者占14.53%。所研究人群的营养风险、营养不良和重度营养不良的发生率均随年龄增长而升高(P＜0.05)。与营养正常组患者相比，营养不良组患者年龄更大(P＜0.001)、身体质量指数更低(P＜0.001)且住院时间更长(P=0.004)，呼吸道感染及慢性阻塞性肺疾病的患病率更高(P＜0.001,P=0.002)，高血压的患病率更低(P=0.019)，但两组患者在性别分布及合并疾病数目方面无统计学差异。研究发现性别对部分淋巴细胞亚群的影响，女性的淋巴细胞、CD4+CD28+T细胞比值更高，而男性的NK细胞更高(P＜0.05)。营养不良患者的Th淋巴细胞、CD4/CD8比值、Treg、初始Th细胞、CD3+CD28+T细胞、CD4+CD28+T细胞、CD8+CD28+T细胞的值更低，而记忆性Ts细胞、CD8+CD28?T细胞的比值更高，具有统计学差异(P＜0.05)。
结论：在所研究的老年住院患者中营养不良发生率较高，且随着年龄的增长，研究人群营养风险、营养不良及重度营养不良的发生率逐渐上升。性别对淋巴细胞、CD4+CD28+T细胞以及NK细胞的影响提示这些亚群的变化可能跟女性的长寿相关。营养不良患者Th细胞、CD4/CD8比值、Treg等亚群的变化提示其可能在营养不良及相关并发症的发生发展中起了关键的作用，对上述这些变化亚群的干预可能可以作为营养不良治疗的靶点。
第二部分老年患者免疫风险表型的研究
目的：免疫风险表型(IRP：immunological risk phenotypes)是一组评价机体免疫功能的指标，可以预测疾病的发生。老年人常伴有免疫功能的下降且常合并营养不良，影响其生活质量及预后。本研究旨在发现老年患者的IRP，从而为延缓免疫衰老、营养与免疫干预等提供依据。
方法：对老年患者进行前瞻性观察队列研究。纳入2014年12月至2017年11月在我院老年病房年龄≥65岁的患者，排除肿瘤、传染性疾病、自身免疫病以及使用影响免疫功能药物的患者。在基线时收集反映营养状况和免疫功能的临床资料和实验室参数以及血清巨细胞病毒抗体。采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群所占比值，包括：淋巴细胞占有核细胞比值，T淋巴细胞、NK细胞、NKT淋巴细胞、Th细胞、Ts细胞以及Treg占淋巴细胞的比值，CD4/CD8比值，初始和记忆性Th细胞、初始和记忆性Th细胞、表达第二受体(CD28+)的T淋巴细胞、Th细胞及Ts细胞、缺失第二受体(CD28?)的Th及Ts细胞占T淋巴细胞的比值。对所有患者进行为期2年的随访，随访终点事件为全因死亡。对比死亡组与存活组患者之间的营养与免疫指标的差异，并通过ROC曲线及生存分析判断对全因死亡的预测价值。
结果：对入组患者进行了为期24个月的电话随访和临床随访，达到随访终点者为170例。患者基线平均年龄为80.84±9.02岁，其中男性133例(占78.2%)，随访期间发生全因死亡的人数为34例。存活及死亡患者在年龄、BMI及住院时长上有显著差异，死亡组患者年龄更大(P＜0.001)、BMI值更低(P＜0.001)、住院时间更长(P＜0.05)。死亡组患者合并呼吸道感染、慢性阻塞性肺疾病的比例更高，而存活组患者患消化系统疾病比例较高(P＜0.05)。对患者进行营养筛查结果显示，死亡组患者NRS2002评分≥3分者高达79.4%，其营养状况更差(P＜0.001)。几乎所有患者既往感染过巨细胞病毒(97.7%)，未发现现状感染者。通过对生物学标记物的分析，发现可能与全因死亡相关的有：低血清白蛋白、前白蛋白水平，低Th细胞、CD4/CD8比值、初始及记忆性Th细胞、CD3+CD28+T细胞、CD4+CD28+T细胞(P＜0.05)，高Ts细胞、初始及记忆性Ts细胞以及CD8+CD28?T细胞(P＜0.05)。以CD4/CD8比值分组，发现免疫风险组的患者男性比重更大(86.89%vs 73.39%)，且年龄更大(82.72±8.64vs79.78±9.10)，BMI值更低(22.91±3.53vs24.44±3.99)(P<0.05)；NKT淋巴细胞以及与CD8相关的淋巴细胞亚群升高，包括初始Ts细胞、记忆性Ts细胞、CD8+CD28+T淋巴细胞以及CD8+CD28?T淋巴细胞(P<0.05)；CD3+CD28+T淋巴细胞以及多个与CD4相关的淋巴细胞亚群降低，包括Treg、初始Th细胞、记忆性Th细胞以及CD4+CD28+T淋巴细胞(P<0.05)；CD4+CD28?T细胞也降低，但无统计学差异。对全因死亡的预测中，CD8+CD28?T细胞预测效果最佳(AUC=0.706)，且具有较高的灵敏度(0.912)；其次为初始Ts细胞(AUC=0.683)，但其灵敏度和特异度不高。生存分析结果显示，CD4/CD8＜1(P=0.009)、淋巴细胞(P=0.043)、Th细胞(P=0.030)、Ts细胞(P=0.035)、初始Ts细胞(P=0.010)、CD3+CD28+T细胞(P=0.002)、CD4+CD28+T细胞(P=0.001)以及CD8+CD28?T细胞(P=0.004)可以预测死亡。
结论：本研究对老年患者的免疫风险表型进行了探索，结果提示除CD4/CD8＜1外，CD8+CD28?T细胞、初始Ts细胞可能是较好的IRP指标，而淋巴细胞、Th细胞、Ts细胞、CD3+CD28+T细胞以及CD4+CD28+T细胞也可用作IRP。男性、高龄及营养不良与免疫风险明显相关。临床上通过相关淋巴细胞亚群的检测以及营养不良的筛查，可对有免疫风险的人群早发现、早诊断、早治疗，改善患者预后。
第三部分老年营养不良患者调节性T细胞的变化
目的：老年人营养不良的发生率较高，容易导致许多不良后果，尤其是各种感染。目前认为这是由于营养不良引起的免疫力下降而导致的，但具体机制尚未完全明确。调节性T细胞是人体重要的免疫细胞，在抑制炎性反应等方面发挥重要作用。本研究旨在探讨调节性T细胞在老年营养不良患者中的数目及功能的变化。
方法：对前期2014年12月至2017年11月期间收集的172例老年住院患者数据进行分析，将患者分为营养不良组与营养正常组，分析两组间调节性T细胞占T淋巴细胞的比例的差异。纳入2019年4月至11月在我院老年病房年龄≥65岁的患者营养不良患者6例，以及性别、年龄相匹配的营养正常患者6例，作为对照组。两组患者均排除：肿瘤、传染性疾病、自身免疫病以及使用激素、免疫抑制剂等影响免疫功能药物的患者。收集患者的一般资料及血清细胞因子IL-6、IL-10及TNF-α的表达情况；采集患者外周血，用磁珠分选法分选出调节性T细胞，采用RT-PCR检测抗凋亡基因Bcl-2、MCL-1及凋亡基因Caspase-3、BID、BAX的表达。对比两组患者调节性T细胞数目、细胞因子表达水平以及凋亡、抗凋亡基因表达的差异。
结果：研究发现，营养不良组外周血调节性T细胞占T淋巴细胞的比例以及调节性T细胞的数目均低于营养正常组(P<0.05)。营养不良患者IL-6及IL-10的分泌高于正常参考值，并显著高于营养正常组(P<0.001及P<0.01)。与正常对照组相比，调节性T细胞的抗凋亡基因Bcl-2、MCL-1在营养不良患者中表达更低(P<0.001)。此外，促凋亡基因Caspase-3、BAX在营养不良患者中的表达更高(P<0.01)，而促凋亡基因BID在两组间无明显统计学差异。
结论：调节性T细胞可能在营养不良引起的免疫功能下降中起着重要作用。营养不良患者外周血调节性T细胞的数目及比值降低，可能与其抗凋亡基因Bcl-2和MCL-1的表达降低、凋亡基因Caspase-3、BAX的表达升高相关。营养不良患者细胞因子IL-6、IL-10的水平增高表明其体内促炎与抗炎过程的相互作用，与调节性T细胞的数目和功能密切相关。通过对调节性T细胞的干预可能可以成为营养不良及其并发症的治疗靶点。