【摘 要】
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目的喉鳞状细胞癌(Laryngeal Squamous Cell Carcinoma,LSCC)是头颈部常见的恶性肿瘤,好发于男性,会导致严重的健康问题,如声音嘶哑、呼吸困难和发音困难。早期发现尚可行保留喉功能的喉部分切除手术,晚期只能行全喉手术,严重影响患者术后的生活质量,终末期只能选择放疗或化疗等治疗方式,死亡率较高。因此,提高LSCC预后的一个重要手段是早期筛查,但目前尚无能够准确诊断LSC
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目的喉鳞状细胞癌(Laryngeal Squamous Cell Carcinoma,LSCC)是头颈部常见的恶性肿瘤,好发于男性,会导致严重的健康问题,如声音嘶哑、呼吸困难和发音困难。早期发现尚可行保留喉功能的喉部分切除手术,晚期只能行全喉手术,严重影响患者术后的生活质量,终末期只能选择放疗或化疗等治疗方式,死亡率较高。因此,提高LSCC预后的一个重要手段是早期筛查,但目前尚无能够准确诊断LSCC的微创筛查工具。氨基酸是机体新陈代谢的产物,肿瘤细胞代谢的改变往往导致氨基酸代谢的改变。本研究的目的是寻找潜在的可用于筛查LSCC的氨基酸分子标志物,以提高LSCC的诊断水平。方法收取2021年10月至2022年2月于郑州大学第一附属医院就诊的20例LSCC患者空腹血浆和15例健康男性空腹血浆,20例LSCC患者的喉癌组织和其中19例的癌旁组织,采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)进行氨基酸代谢的定量检测。每次共检测22种氨基酸。建立偏最小二乘判别分析(PLS-DA)和正交-偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型,更直观地观察实验组和对照组的分离度,并计算OPLS-DA的VIP值;对比LSCC患者血浆和健康人血浆中的氨基酸定量代谢水平、LSCC患者癌组织和癌旁组织的氨基酸定量代谢水平,采用独立样本t检验;通过VIP>1和P<0.05找出实验组和对照组具有差异的氨基酸。对存在差异的氨基酸建立ROC曲线,测ROC曲线下面积(AUC),评估差异氨基酸的灵敏度和特异度,最终筛选出对LSCC有鉴别诊断价值的氨基酸。结果对LSCC患者血浆和健康人血浆与LSCC喉癌组织和癌旁组织的对比研究中共发现了 12种差异氨基酸。LSCC患者血浆和健康人血浆中氨基酸水平发现有6种氨基酸的差异有统计学意义(P<0.05且VIP>1),分别为天冬酰胺、丝氨酸、高半胱氨酸、组氨酸、鸟氨酸盐酸盐、色氨酸。且这些差异氨基酸在LSCC血浆中的水平均低于健康人血浆中的水平。对这6种差异性氨基酸建立ROC曲线,可以发现高半胱氨酸、天冬酰胺、组氨酸、鸟氨酸盐酸盐、丝氨酸、色氨酸的AUC值均大于0.7,证明其均有一定的预测准确性。LSCC患者癌组织与癌旁组织中氨基酸水平有8种氨基酸的差异有统计学意义(P<0.05且VIP>1),其中酪氨酸P<0.05,而天冬酰胺、异亮氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、高半胱氨酸P<0.01的代谢物差异更有统计学意义。且这些氨基酸在喉癌组织中的水平均高于癌旁组织中的水平。其中天冬酰胺、天冬氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、酪氨酸AUC值处于0.7-0.9之间,说明有一定的预测性,而高半胱氨酸、谷氨酸AUC值大于0.9,证明它们两个有较高预测性。其中有2个差异性氨基酸即天冬酰胺和高半胱氨酸共同存在于血浆和组织样本中。通过其AUC的大小可以得出,高半胱氨酸和天冬酰胺可能是临床上诊断LSCC的有效生物标志物。结论在本项研究中,通过综合分析可以得出高半胱氨酸和天冬酰胺可能对诊断LSCC有重要意义,有作为新的有效生物标志物的潜力。LC-MS代谢组学技术有助于LSCC生物标志物的发现,并且为肿瘤代谢机制提供了科学依据。
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