六味地黄丸浓缩丸质量控制的研究

来源 :河南中医学院 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhengpeng19860223
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目的:六味地黄汤是常用的经典方之一,用于滋补肾阴,其补肾作用疗效突出。来源于《小儿药证直诀.卷下诸方》,由熟地、酒茱萸、丹皮、山药、茯苓、泽泻六种中药材组成,配方严格,配伍适当,疗效显著。浓缩六味地黄丸作为其重要制剂剂型之一,在临床上应用广泛,并且在中成药中有非常重要的地位。目前对浓缩六味地黄丸质量控制多以丹皮酚,马钱苷为指标成分。丹皮酚主要存在于药材丹皮中,马钱苷主要存在于药材山茱萸中,而丹皮和山茱萸只是方中两味药材,不能完全反映六味地黄丸的质量。如方中熟地黄作为该方的君药,就缺乏良好的检测方法。为更好的对复方制剂进行质量控制,建立有效而且合理的质量标准,对其有效化学成份定量研究进行补充和完善,方中每一味药材都含有多糖,相关文献报道,多糖具有显著的药理作用。综上所述,本文以莫诺苷、马钱苷、芍药苷、多糖作为浓缩六味地黄丸定量研究对象,虽然不能完全反映六味地黄丸的内在质量,但还是可以在一定程度上提高其质量标准。  1.方法:将间羟基联苯法和苯酚-硫酸法两种测定多糖的方法连用,按照紫外分光光度法原理,测定六味地黄中总多糖的含量。以半乳糖醛酸为对照品,用间羟基联苯法测定该方中糖醛酸的百分含量,并且准确测得浓缩六味地黄丸多糖中糖醛酸的平均百分含量为13.93%,R S D为0.4%;以葡糖糖单糖为对照品,用苯酚-硫酸法测定该方多糖的百分含量,测得六味地黄丸中多糖含量为27.24%(g/g)。然后取适量糖醛酸对照品,配制成标准溶液,按苯酚-硫酸法实验条件做校正曲线,将间羟基联苯法测得的糖醛酸含量带入校正曲线进行校正,就可以得到相对应的紫外光吸收值。将该法测得的吸收值从苯酚-硫酸法测得的多糖的吸收值中扣除,将剩下的吸度值带入苯酚-硫酸法的标准曲线中换算得到中性糖的百分含量,中性糖百分含量与酸性糖醛酸百分含量加和即得总多糖的百分含量39.58%。  结论:实验结果表明该方法较实用,可作为浓缩六味地黄丸总多糖的含量测定。2.方法:探索并初步建立了用HPLC法同时测定的浓缩六味地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷含量的有效合理方法。通过对山茱萸原药材和丹皮的原药材进行的定量研究,并用山茱萸原药材和丹皮的原药材制成的阴性对照液,用高效液相色谱法的空白对照法证明了莫诺苷、马钱苷来自山茱萸,芍药苷来自牡丹皮。这些研究都在一定程度上改进了药典中浓缩六味地黄丸的质量控制方法。经筛选同时测定三种有效成分的较合适色谱条件为:色谱柱为 XtimateTM C18(4.6 mm×250mm,5μm)类型色谱柱;流动相为乙腈一0.05%磷酸水溶液(体积比10:90);选取检测波长为233 nm;柱温为30℃;流速为1.0mL/min。莫诺苷、马钱苷、芍药苷保留时间分别为9.5min、21.1min、29.4min。与相邻峰的分离度均大于1.5,干扰成分较少。莫诺苷线性方程为Y=1.7614X+2.8154(;r=0.99997),线性范围0.0104μg至0.1040μg,马钱苷线性方程为 Y=1.5132X+3.2146(0.9999),线性范围0.01092μg至0.1092μg,芍药苷的线性方程为 Y=2.265X-14.241(0.9995),线性范围0.018μg至0.18μg,采用该实验条件可以较准确测出了三种有效成分结论:实验结果表明该方法方便、准确、可作为浓缩六味地黄丸中莫诺苷、马钱苷、芍药苷的含量同时测定方法。
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