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系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)作为一种高度异质性的自身免疫病,临床表现复杂多样化,病因不明,至今还没有根治的办法,如何避免或延缓不可逆的组织脏器的病理损害至关重要。SLE的发病机制中有多种因素参与,目前研究认为是在不同的遗传易感性的基础上,在环境或病毒感染促发下,机体免疫系统功能紊乱、自身免疫耐受打破而引起多系统病变。T、B细胞功能失控是SLE发病的重要机制,在细胞水平,CD4+T细胞活性增强,CD8+T细胞及NK细胞功能缺陷导致对B细胞缺乏有效的反馈抑制,TCR/CD3(T cell receptor, TCR)复合亚单位TCR-ζ链的缺失、FcRγ取代TCR-ζ链引发T细胞信号传导障碍是T细胞免疫功能异常的基础。近年来,B细胞通过其抗体介导及非抗体介导作用在SLE发病研究中受到重视,研究显示B细胞可以不依赖T细胞方式发生活化,在T细胞缺失的B细胞刺激因子(Blymphocyte stimulator/B-cell lymphocyte-activating factor, BLyS/BAFF)转基因小鼠中,高水平BAFF通过其受体跨膜激活剂及钙调亲环素配体相互作用分子(transmembrane activator and calcium modulator and cyclophilin ligandinteractor, TACI)与Toll样受体(Toll-like receptors, TLRs)中的TLR7和TLR9形成正性交联作用,促进B细胞异常活化和自身抗体生成,类似于SLE表现。由此,BAFF、TACI、B细胞的内生性活化成为SLE发病中的研究热点。B细胞刺激因子(BAFF或BLyS)属于肿瘤坏死因子家族,由单核细胞、巨噬细胞、树突样细胞(dendritic cells, DCs)、T细胞、活化粒细胞分泌,正常情况下通过B细胞刺激因子受体3(BLyS receptor3, BR3)、TACI、B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen, BCMA)三个受体控制着B细胞的动态平衡和免疫耐受。在B细胞的发育过程中,BLyS与其受体结合,对于过渡期B细胞(transitional stage, TR)以及成熟B细胞至关重要。BLyS过度表达时可使过渡期(T2)自身反应性B细胞逃逸阴性选择,导致多种自身免疫现象。在其受体中,BR3促进幼稚B细胞存活,但TACI的作用目前仍难以明确,一方面,TACI除了与BLyS结合外,还能与增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand, APRIL)结合,促进抗体生成及IgA转换；另一方面,在TACI基因突变或缺失小鼠,TACI的负性调节作用得到体现。因此TACI的作用仍待深入。本实验从临床入手,选取初发SLE病人,探讨病人外周血中B细胞亚群变化情况,并且检测可溶性BLyS水平及BR3、TACI受体表达水平,分析上述指标与SLE临床活动度关联情况；借助于TACI融合蛋白(TACI soluble fusion protein,TACI-Ig)、进一步从体外实验探讨重组人B淋巴细胞刺激因子(recombinant human BLyS,rhBLyS)刺激下单个核淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)增殖作用及亚群、BR3、TACI受体变化。目的：采用SLE患者外周血,以BLyS切入点,观察BLyS以及BR3、TACI受体表达,分析与SLE疾病活动度的关系,进一步分析B细胞亚群,明确SLE病人体内B细胞亚群发生变化,探讨BLyS及其两个受体通过介导B细胞活性在SLE发病中的作用；借助TACI-Ig对体外rhBLyS刺激SLE病人外周血PBMC作用的影响,探讨TACI-Ig对SLE治疗作用的机制。方法：选取30例初发SLE病人及20例年龄、性别相匹配的健康体检者入选本研究。完善临床资料,进行SLE临床活动度(systemic lupus erythematosis disease activity index, SLEDAI)评分,采用SLE病人外周血,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清可溶性BLyS水平；应用流式细胞术检测检测B细胞表面BR3、TACI受体以及淋巴细胞表面CD分子(CD19+CD5+,CD19+CD38+,CD19+CD27+, CD4+CD25+Foxp3)表达情况变化；利用实时定量PCR (real time fluorescent quantitation PCR, qRT-PCR)检测BR3、 TACI mRNA含量；MTT法检测体外rhBLyS诱导PBMC增殖情况以及TACI-Ig对rhBLyS诱导增殖作用的影响并流式细胞术检测TACI-Ig作用后B细胞表面BR、TACI受体表达变化。结果：1. ELISA法检测BLyS水平,发现SLE病人组血清BLyS水平较正常对照组升高(P<0.05)；2.流式细胞术检测B细胞表面BR3平均荧光强度(mean fluorescence index, MFI)在SLE病人组与正常对照组无显著性差异(P>0.05),但SLE患者B细胞表面表达TACI MFI明显高于正常对照组(P<0.01)。RT-PCR检测BR3mRNA和TACI mRNA水平在SLE病人组均显著增高(P<0.05)；3. CD5+, CD27+, CD38+在外周血B细胞表面表达百分比均较正常对照组明显增高(P<0.05),SLEDAI积分与CD19+CD27+、CD19+CD38+细胞百分比正相关(均P<0.01)；4.与正常对照相比,SLE患者组CD4+CD25+Foxp3百分比低于正常对照组(P<0.05)；5.SLE患者的BLyS水平与SLEDAI积分正相关(P<0.05),BLyS水平与TACI MFI呈正相关(P<0.05);6. TACI MFI与SLEDAI积分正相关(P<0.01),而BR3表达与SLEDAI积分未呈现相关性。7.TACI MFI与淋巴细胞绝对数(P<0.01)、B细胞绝对数(P<0.05)呈负相关,与抗ds-DNA滴度(P<0.01)、肾脏受累病例数(P<0.05)呈正相关；8.rhBLyS诱导PBMC增殖的亚适浓度为1μg/mL,适宜时间为24小时；TACI-Ig1、10、100μg/mL可下调rhBLyS诱导的PBMC的增殖。SLE患者PBMC经TACI-Ig作用后,CD19+CD38+百分比下降,BR3、TACI表达下降。结论：1.SLE患者外周血BLyS水平明显增加,与SLEDAI积分呈正相关；2.与BLyS水平升高相对应,SLE患者PBMC的BR3、TACI mRNA表达均明显增加；但在B细胞表面仅TACI表达增多,BR3表达与正常对照组无明显差异；3.与正常对照组相比,SLE患者外周血浆细胞、记忆性B细胞和B1B细胞比例明显增高；调节性T细胞比例下降；4.升高的BLyS、TACI表达均与SLEDAI积分正性关联,二者可以作为新的生物指标用于SLE的临床诊断,亦可作为SLE治疗效果的判断指标。4. TACI-Ig可下调rhBLyS诱导的SLE患者PBMC的增殖反应,下调rhBLyS诱导的SLE患者CD19+CD38+百分比以及BR3、TACI在B细胞的表达。