【摘 要】
:
背景人T淋巴细胞白血病1型病毒(HTLV-1)是一种逆转录病毒,有Ⅰ型(HTLV-Ⅰ)和Ⅱ型(HTLV-Ⅱ)之分,HTLV-Ⅰ病毒的传播途径一般为血液输注、性接触或经产道、胎盘、母乳喂养等母胎垂直传播,可引起成人T淋巴细胞白血病(ATL)、HTLV-1相关性脊髓病/热带痉挛性瘫痪(HAM/TSP)等疾病。HTLV-1病毒感染后的潜伏期较长,可长达数十年,约2%~5%无症状携带可诱发成ATL,此病临
论文部分内容阅读
背景人T淋巴细胞白血病1型病毒(HTLV-1)是一种逆转录病毒,有Ⅰ型(HTLV-Ⅰ)和Ⅱ型(HTLV-Ⅱ)之分,HTLV-Ⅰ病毒的传播途径一般为血液输注、性接触或经产道、胎盘、母乳喂养等母胎垂直传播,可引起成人T淋巴细胞白血病(ATL)、HTLV-1相关性脊髓病/热带痉挛性瘫痪(HAM/TSP)等疾病。HTLV-1病毒感染后的潜伏期较长,可长达数十年,约2%~5%无症状携带可诱发成ATL,此病临床预后较差、死亡率较高。为了深入探讨HTLV-1病毒感染及致病的病理机制,部分学者尝试从分子免疫抑制角度制约病毒复制与转录。我们前期研究结果显示,He La等细胞感染HTLV-1病毒后免疫耐受分子人白细胞抗原-G(HLA-G)会出现异常表达现象,且HLA-G会影响HTLV-1相关蛋白的表达,其原因可能是HLA-G分子与CD8+T细胞等免疫细胞结合后有效抑制了其杀伤活动,促使HTLV-1病毒复制增强。基于此,我们拟深入探讨HLA-G在HTLV-1病毒感染的T细胞中发挥的具体作用,为HTLV-1相关疾病的诊治提供新的思路。目的观察T淋巴细胞中的HLA-G表达情况,探究HLA-G在成人T淋巴细胞白血病1型病毒(HTLV-1)感染发生发展中的具体功能。方法1.通过免疫印迹法(Western blot)及荧光实时定量PCR(Real-time PCR)测定HLA-G分子在Jurkat、MOLT4细胞(HTLV-1阴性T细胞)及MT2、MT4细胞(HTLV-1阳性T细胞)中的表达变化。2.以MT4-Jurkat细胞共培养体系建立HTLV-1病毒感染的细胞模型,将MT4细胞与Jurkat细胞共培养24小时,免疫印迹检测病毒感染前后Jurkat细胞的HLA-G表达变化情况。3.设计三组能够沉默HLA-G的si RNA,并通过Western blot实验选出在MT2及MT4细胞中沉默效果最好的一组,随后利用带有荧光cy3标签的对照si RNA进行脂质体转染效率的测定。4.利用筛出的si RNA沉默MT2及MT4细胞中的HLA-G,并在m RNA和蛋白水平上观察HLA-G分子对HTLV-1相关蛋白Tax、P19表达水平的影响。5.同时利用Real-time PCR技术,在RNA水平监测HLA-G基因沉默后,MT2及MT4细胞中抗病毒细胞因子的表达变化情况。6.使用CCK8细胞增殖实验观察HLA-G沉默前后白血病细胞MT2、MT4的增殖能力变化。7.在HTLV-1阳性T细胞中沉默HLA-G后,使用Western blot检测STAT3通路相关蛋白的变化。结果1.HTLV-1病毒阳性的T细胞高表达HLA-G分子:与MOLT4、Jurkat(HTLV-1病毒阴性)相比,MT2、MT4细胞(HTLV-1病毒阳性)在m RNA和蛋白水平均高表达HLAG分子;且使用MT4细胞与Jurkat细胞共培养24h后,发现HTLV-1病毒感染能诱导Jurkat细胞中的HLA-G蛋白异常表达。2.筛出的si RNA转染有效,si(3)-HLA-G的干扰效果最好;在荧光显微镜10倍镜下可见约70%的MT2细胞发出红色的荧光,结果显示si RNA转染较成功。3.沉默HLA-G可影响HTLV-1病毒蛋白的表达:HLA-G基因沉默后,MT2及MT4细胞中Tax、P19在m RNA及蛋白水平表达均呈下降趋势。4.沉默HLA-G可影响其细胞因子表达:HLA-G基因沉默后,MT2及MT4细胞中IFN-γ及TNF-α升高,IL-6表达降低。5.沉默HLA-G可抑制白血病细胞增殖能力:在HTLV-1阳性的白血病细胞MT2、MT4中沉默HLA-G基因后,细胞的增殖能力明显降低。6.沉默HLA-G可抑制STAT3相关通路蛋白的表达:HTLV-1阳性T细胞HLA-G基因沉默后STAT3磷酸化水平明显降低,而总STAT3水平变化不大。结论HTLV-1病毒能诱导T细胞高表达免疫耐受性分子HLA-G,抑制HLA-G的表达可促进抗病毒因子的产生,降低IL-6的表达及STAT3磷酸化水平,抑制细胞增殖,从而可能有效抑制HTLV-1病毒的复制与传播。
其他文献
随着经济的高速发展,柴油车的持有量与日俱增,柴油的消费量居高不下。同时,随着环保法规的日益严格,柴油的高效清洁转化已成为各大炼油企业面临的重要挑战。柴油中含硫化合物的深度脱除是生产超低硫柴油的关键。传统的工业催化剂采用γ-Al2O3作为载体,而γ-Al2O3载体会与活性组分产生非常强的相互作用,无法做到深度脱硫。近年来,碳材料在加氢脱硫领域的研究表明,碳材料与活性组分的相互作用较弱,能够提高加氢脱
化工中间体如苯乙酮、苯酚等在合成各种生活用品、药物等方面占据着重要地位。工业上制备苯乙酮和苯酚的工艺十分复杂且对环境有严重污染,用清洁的氧化剂(O2或H2O2)将乙苯、苯直接氧化为苯乙酮或苯酚被认为是理想的工艺。过渡金属基(Fe、Co和Cu等)单原子催化剂(SAC)因其独特的性质在乙苯和苯直接氧化中表现出较为优异的性能,但也面临活性位点少、反应条件严苛、产物选择性差等问题,这严重限制了其产业化发展
背景热射病又称为重度中暑(SHS)是指高温高湿环境或剧烈活动下体内产热与散热失衡导致中枢神经系统异常的热相关性致命疾病,其死亡率极高,易引起全身炎症反应综合征(SIRS)和多器官功能衰竭(MODS),如神经功能缺损、心血管衰竭、肝衰竭和肾衰竭。凝血功能障碍是热射病的常见并发症,严重时可发展为弥散性血管内凝血(DIC),是重度中暑死亡的主要危险因素之一。研究表明,血管内皮病变在重度中暑引发的凝血功能
由固体颗粒装填而成的填充床反应器具有广泛的工业应用,研究填充床内的空隙结构和流体在空隙间的流动规律是准确描述填充床反应器的传递和反应行为的关键。相比于填充所用的球形和圆柱外形颗粒,三叶草颗粒外形复杂且数值模拟方法不成熟,目前还缺乏对三叶草颗粒填充床空隙结构和流动规律的系统研究。本文利用刚体动力学(RBD)法模拟三叶草颗粒的填充过程。对于生成的床层,从总空隙率、径向空隙分布和颗粒朝向分布三个方面对空
背景多发性硬化症(Multiple Sclerosis,MS)是一种常见的中枢神经系统(Central Nervous System,CNS)自身免疫和神经退行性疾病。目前临床上尚无有效的治愈方法,而且传统的免疫抑制药物无法对病人受损的神经组织进行修复再生。干细胞移植是MS的一种新的治疗策略。我们的前期研究结果表明,经血源性子宫内膜干细胞(Menstrual Blood-derived Mesen
随着能源需求的日益增加和化石燃料的日益枯竭,开发可再生能源成为了至关重要的问题。可再生能源,例如太阳能,潮汐能和风能等间歇性能源是解决能源需求的替代能源。但是由于它们是间歇性能源,因此电化学水分解将电能(从间歇性可再生能源中转化获得)转化为化学能是更有效的方式。但是水分解过程是一个缓慢的动力学过程,因此,需要通过高效的电催化剂来实现。目前,铂基和Ru/Ir基化合物是最有效的HER和OER电催化剂。
目的流动人口数量庞大,在我国中大型城市中广泛存在,卫生健康不只是个人问题,还是关系到健康中国是否顺利进行的社会问题。所以要通过了解其医疗服务利用,关注他们的需求,解决其医疗难题,提高其健康水平,助力健康中国。方法本研究梳理了国内外相关研究,基于国家卫健委2018年最新的流动人口动态监测数据(CMDS2018),结合安德森模型,用描述性统计方法探讨各因素与流动人口医疗卫生服务的关系,最后用二阶段最小
背景溴代苯酚是水环境中近年来主要的消毒污染物之一,这类污染物具有较强的三致效应、内分泌干扰作用等,是首要控制污染物之一。对于溴代苯酚这类有机污染物来说,光化学转化是其在环境中最为有效的转化和消除途径之一,因此,针对这一行为进行研究,将会为水体中溴代苯酚这类消毒副产物的消减和控制提供研究思路。目的建立水相中痕量溴代苯酚的柱前衍生-固相萃取-气相色谱-质谱法。并考察水环境中典型环境因子对2,4-二溴苯
光芬顿和电芬顿是高级氧化工艺中的热门技术,是处理持久性有机污染物的有效方法。α-Fe2O3由于带隙窄,光响应效果好而在光芬顿领域得到广泛应用,但是依然面临光利用率低,H2O2消耗量大,电子-空穴复合速率快和结构稳定性差等缺陷。在电芬顿反应中,Fe S2由于较强的氧化还原能力和自主调节p H的能力被认为是理想的阴极材料。然而,Fe S2依然受两电子氧还原反应的选择性差,导电性弱和循环稳定性不足等限制
随着石油资源的重质化,提高石油的利用率无疑是当今石油炼制行业的突出任务。含氮化合物在重质油品中含量较高,对油品后续的加工利用和石油产品的储存都有不利影响。深入系统研究重质油中含氮化合物的分子组成和结构分布及转化规律,对重油资源的高效利用和清洁燃料生产具有重要的理论支撑意义。高分辨质谱具有超高的分辨率可以提供石油分子的准确组成。离子淌度质谱在同分异构体的分离方面具有显著的优势,可以提供分析物的碰撞截