目的:本实验以活性氧为刺激因子,选择体外分离培养的原代小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞为研究对象,建立该原代细胞的分离方法并构建其氧化损伤模型,并通过该原代细胞模型研究维生素C对该细胞氧化损伤的保护作用,为研究肺部疾病提供实验基础并为建立维生素C在呼吸系统疾病药品开发中的应用提供实验依据。材料和方法:1.原代小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞的分离、培养与鉴定。2.建立原代小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的氧化损伤模型:采用不同浓度（0.5mmol/L、1mmol/L、1.5mmol/L）的H₂O₂刺激细胞,并在不同的时间点（6h、12h、24h）用CCK-8法对细胞存活率进行测定,并辅以细胞损伤前后形貌观察和Hoechst染色法观察细胞凋亡,最终确定原代小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞氧化模型制作的条件。3.研究维生素C对H₂O₂诱导的原代小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞氧化损伤的保护作用。实验分成正常组（无血清上皮细胞培养基组）、H₂O₂损伤模型组（1mmol/L,6h）、维生素C各剂量保护组（25μmol/L、50μmol/L、75μmol/L）,CCK-8法测定细胞活力。实验组同时测定细胞中总蛋白含量,丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性来观测维生素C对H₂O₂诱导原代小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞氧化损伤的保护作用。结果:1.本研究通过实验确定的原代小鼠Ⅱ肺泡上皮细胞损伤模型制作的最佳条件为:H₂O₂浓度为1mmol/L,作用时间为6h。2.正常组及维生素C各剂量保护组细胞活力、蛋白质含量、SOD活性均高于H₂O₂损伤模型组,差异有显著性（P<0.05）;损伤模型组MDA含量高于正常组和维生素C各剂量保护组,差异有显著性（P<0.05）。结论:1.成功建立了分离原代小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞的方法;2.原代小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞H₂O₂损伤模型建立成功;3.维生素C对H₂O₂引起的氧化损伤有保护作用但不与其浓度成剂量相关性。