【摘 要】
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目的:本试验使用乳酸菌（LAB）和肌肽（CAR）单独或联合处理正常小鼠和地塞米松（DXMS）致应激小鼠,通过观察小鼠心肌、骨骼肌组织的显微结构和超微结构变化以及检测肌肉损伤和氧化应激相关指标,检测抗氧化基因表达和抗氧化酶活力的变化,研究LAB与CAR单独或联合使用对小鼠骨骼肌和心肌氧化应激的防御作用。方法:本试验将96只ICR小鼠随机分为8组,每组12只,分别为:对照组（Control）、乳酸菌组
【基金项目】
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山西省重点研发计划项目（201803D221022-4）； 国家自然科学基金（31872438）； 山西农业大学中青年拔尖创新人才支持计划（BJRC201204）； 山西农业大学横向科技项目（2015HX12）；
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目的:本试验使用乳酸菌（LAB）和肌肽（CAR）单独或联合处理正常小鼠和地塞米松（DXMS）致应激小鼠,通过观察小鼠心肌、骨骼肌组织的显微结构和超微结构变化以及检测肌肉损伤和氧化应激相关指标,检测抗氧化基因表达和抗氧化酶活力的变化,研究LAB与CAR单独或联合使用对小鼠骨骼肌和心肌氧化应激的防御作用。方法:本试验将96只ICR小鼠随机分为8组,每组12只,分别为:对照组（Control）、乳酸菌组（LAB）、肌肽组（CAR）、乳酸菌+肌肽组（LAB+CAR）、地塞米松组（DXMS）、地塞米松+乳酸菌组（DXMS+LAB）、地塞米松+肌肽组（DXMS+CAR）、地塞米松+乳酸菌+肌肽组（DXMS+LAB+CAR）。在小鼠适应性饲养7天后,进行14天的乳酸菌、肌肽处理,Control组和DXSM组每天灌胃生理盐水,LAB组、DXMS+LAB组、CAR组、DXMS+CAR组则灌胃乳酸菌液0.2 m L/10g（活菌数为1.0×10~9CFU/m L）或肌肽（300 mg/kg）,LAB+CAR组、DXMS+LAB+CAR组同时灌胃乳酸菌和肌肽;随后在以上处理不变的条件下,DXMS组、DXMS+LAB组、DXMS+CAR组、DXMS+LAB+CAR组腹腔注射地塞米松磷酸钠注射液（15 mg/kg）,其余各组腹腔注射等量的0.9%的生理盐水。在开始处理小鼠之后,每3天称量一次小鼠体重,在地塞米松注射的第7天,每组随机取6只小鼠解剖采样,然后在透射电镜和光镜下观察骨骼肌以及心肌的结构,荧光定量PCR检测抗氧化基因的表达并使用ELISA法检测抗氧化酶的活性以及氧化应激和肌肉损伤相关指标。结果:本试验中,DXMS组的小鼠体重增长速率明显低于Control组,而DXMS+LAB+CAR组相比于DXMS组,小鼠体质量变化趋势由降低变为正增长。通过光镜观察DXMS组小鼠心肌纤维出现溶解现象,骨骼肌横截面积显著低于Control组,肌纤维间隙也变大,通过透射电镜观察发现,DXMS组小鼠心肌的肌原纤维出现大部分溶解现象,线粒体破裂出现明显的空泡化,骨骼肌的肌原纤维断裂,线粒体破损,肌节长度不均且Z线模糊;DXMS+LAB+CAR组相比于DXMS组心肌纤维形态有了明显的好转,排列更加紧密,走向更为整齐,肌原纤维形态更加趋于正常,线粒体质膜完整,形态正常,骨骼肌横截面积更大,肌原纤维排列整齐,Z线清晰。相比于对照组,DXMS组心肌组织中ROS水平显著升高,Keap1、SOD2、GSH-Px、HO-1基因的表达量显著升高,Nrf2基因表达水平显著降低,CAT、HO-1抗氧化酶活力显著升高;骨骼肌中的ROS水平显著升高,GSH-Px基因表达量显著升高,SOD1、CAT基因表达量显著降低,SOD1酶活力显著降低,HO-1酶活力显著升高;DXMS+LAB+CAR组与DXMS组相比,小鼠心肌组织中Nrf2、SOD1基因表达量显著升高,Keap1、HO-1基因表达水平显著降低,CAT酶活力显著降低,GSH-Px活力显著降低;骨骼肌中Nrf2、Keap1、SOD1、SOD2、HO-1、CAT基因表达量显著升高。结论:乳酸菌联合肌肽对地塞米松导致的骨骼肌和心脏指数下降有明显缓解作用,并且能够改善地塞米松引起的肌原纤维断裂以及线粒体空泡化。乳酸菌联合肌肽能够改善地塞米松引起的肌原纤维断裂以及线粒体空泡化,部分机制可能与乳酸菌联合肌肽能够改善心肌和骨骼肌中部分抗氧化基因表达和抗氧化酶活性有关。
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