【摘 要】
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前言 高同型半胱氨酸血症(HHcy)是动脉粥样硬化(AS)发生的一个独立危险因素。但其致AS的具体分子机制还不十分清楚。目前多数研究认为,高Hcy导致血管内皮功能损害,是AS发
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前言 高同型半胱氨酸血症(HHcy)是动脉粥样硬化(AS)发生的一个独立危险因素。但其致AS的具体分子机制还不十分清楚。目前多数研究认为,高Hcy导致血管内皮功能损害,是AS发生的始动环节。故深入研究HHcy对血管内皮细胞功能的损伤机制尤为重要。众所周知,血管内皮细胞可以合成和分泌血管舒张因子NO和收缩因子ET。正常情况下,两者保持平衡与稳定,来维持血管的舒缩状态。当内皮细胞受损时,NO的生成和释放缺陷,平衡倾向于ET,从而导致体内血管收缩呈优势,舒张功能下降。而血管舒张功能降低,是AS最早的表现。有研究显示,生理情况下,NO是由内皮细胞经eNOS专一性催化左旋精氨酸生成;而血管ET系统也以内皮细胞产生的ET-1为主要表达。另有实验表明,Hcy可导致内皮细胞分泌ET-1明显升高,ET-1mRNA表达增加;生成NO下降,eNOSmRNA表达减少。推测HHcy能影响血管内皮细胞eNOSmRNA及ET-1mRNA的表达。本研究对培养的HUVEC ECV304细胞施以不同浓度Hcy处理后,检测其eNOS及E T-1的转录水平,借以证明Hcy对血管内皮功能的损伤,进而探讨其致AS的机制。 实验材料与实验方法 一、实验材料 1、实验细胞:人脐静脉内皮细胞ECV304细胞株 2、主要试剂及药品:同型半胱氨酸,胎牛血清,RPMI1640培养基,Trizol RNA抽提试剂,RT-PCR试剂盒,eNOS引物,ET-1引物,β-actin引物,PBS缓冲液,青霉素,链霉素。
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