Hydrocoating 固相化学偶联技术的研究

来源 :中国原子能科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiayueye
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本文研究了 Hydrocoating固相化学偶联技术。用 2,2,2-三氟乙基磺酰氯和对甲基苯磺酰氯对可溶性葡聚糖进行处理,或者用高碘酸钠对聚乙烯醇和葡聚糖进行氧化,使葡聚糖或聚乙烯醇大分子结构中羟基得以活化。活化的葡聚糖和聚乙烯醇分子与表面带有氨基的固相偶联,得到的Hydrocoating活化固相制品可直接用来固定生物分子。我们对Hydrocoating法的各种包被条件进行实验并得到了最佳的包被条件:①葡聚糖氧化活化液、聚乙烯醇氧化活化液、葡聚糖三氟乙基磺酰活化液和葡聚糖对甲基苯磺酰活化液的包被浓度分别为 2mg/ml、2mg/ml、0.02mg/ml和 0.05mg/ml;②高碘酸钠与葡聚糖和聚乙烯醇的羟基摩尔比1.5为葡聚糖和聚乙烯醇活化液中氧化剂最佳的加入量;③TSH抗体包被液中PEG的加入量为 15%(重量百分数);④选择乙醇胺封闭液和NaBH4封闭液作为 Hydrocoating法的封闭体系。用Hydrocoating法活化的试管在抗体的固定量和固定牢固程度、非特异性吸附和稳定性等方面的性能优于用物理吸附法包被的试管。特别是,Hydrocoating法能有效地对T4小分子进行固定,而这点对于物理吸附法是难以做到的。
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