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目的脑中β-淀粉样蛋白（β-Amyloid,Aβ）的异常积累是阿尔茨海默病（Alzheimer’s diseasse,AD）发病机制和进程的主要因素之一。P-糖蛋白（P-gp）作为ATP转运家族成员之一,在治疗AD中发挥着清除Aβ的作用。病理性血脑屏障（Blood-brain barrier,BBB）中P-gp的表达低于正常水平,阻碍了Aβ的清除。外泌体（Exosome,Ex）作为一种细胞分泌的微小囊泡,不同来源的Ex携带的功能性蛋白及RNA在AD和其它疾病的治疗中有着一定的作用。依达拉奉（Edaravone,Eda）作为一种自由基清除剂,在治疗脑卒中和AD等神经性疾病有着积极的作用。本文拟将Ex研究开发成新型药物载体,采用超速离心方法获得脑微血管内皮细胞（HBMVECs）衍生的外泌体（HBMVECs-Ex）,并考察其对模型药物Eda的装载能力,分析HBMVECs-Ex对P-gp表达的影响和Aβ转运效率的影响;探讨HBMVECs-Ex对Eda的载药能力,及对AD小鼠的学习记忆的影响及作用机制,实现在载体与药物的双重治疗效果。方法采用超速离心分离提取HBMVECs-Ex,使用Western Blot、电位纳米粒度分子量分析仪、原子力显微镜（AFM）对HBMVECs-Ex的特异性蛋白、粒径及表面形态进行表征。采用单层HBMVECs细胞模拟血脑屏障,探讨HBMVECs-Ex对Aβ清除效率的影响;使用Western Blot实验探讨Aβ与P-gp之间的相互作用,以及HBMVECs-Ex对Aβ预处理后HBMVECs中P-gp的影响。使用共聚焦显微镜,观察HBMVECs细胞对Di I标记的HBMVECs-Ex的摄取情况及机制。采用侧脑室注射Aβ1-42诱导建立AD小鼠模型;使用Morris水迷宫实验（Morris Water Maze test,MWM）,分析不同组别之间小鼠学习记忆能力的差异;采用尼氏染色,探讨HBMVECs-Ex的神经保护作用;使用免疫荧光实验,探讨HBMVECs-Ex对AD模型鼠体内P-gp和Aβ清除效率的影响。应用孵育法制备负载Eda的HBMVECs-Ex（Eda-HBMVECs-Ex）;使用紫外分光光度计考察HBMVECs-Ex对依达拉奉的装载效率;应用HPLC法,对小鼠脑内Eda含量进行分析;使用MWM,探究Eda-HBMVECs-Ex能否进一步改善AD小鼠学习记忆能力。结果本文使用超速离心成功分离得到了HBMVECs-Ex,且得到的HBMVECs-Ex分散性良好,粒径均一。在体外实验中,采用Aβ1-42作为药物工具建立痴呆血脑屏障模型,研究HBMVECs-Ex对BBB的保护作用。结果表明HBMVECs-Ex具有恢复Aβ1-42预处理后HBMVECs中P-gp表达的功能。Western Blot实验及Aβ的体外透过实验中,与Aβ1-42预处理细胞相比,给予HBMVECs-Ex显著提高了HBMVECs中P-gp水平,同时显著提升FITC-Aβ42在体外BBB模型中透过能力。摄取实验中,HBMVECs表现出对HBMVECs-Ex大量的摄取,仅在1h时便观察到摄取,3h时摄取到达饱和。在体内实验中,采用Aβ1-42作为药物工具,通过侧脑室注射建立了AD小鼠模型,研究HBMVECs-Ex对模型小鼠的神经保护作用。结果表明给予尾静脉注射HBMVECs-Ex,具有调节小鼠体内P-gp的表达、增强Aβ清除、改善AD小鼠学习记忆能力的作用。在Morris水迷宫实验中,HBMVECs-Ex降低了AD小鼠的逃避潜伏期、增加了穿越平台次数及平台所在象限百分比;尼氏染色结果中,HBMVECs-Ex对海马区神经元具有一定的保护作用;在免疫荧光实验中,HBMVECs-Ex能够显著增加P-gp的表达,增强Aβ的清除效率。成功制备了Eda-HBMVECs-Ex,通过紫外分光光度计定量考察HBMVECs-Ex对依达拉奉的包封率,结果显示包封率在20%以上;通过高效液相色谱仪的分析小鼠脑内依达拉奉的含量,结果显示HBMVECs-Ex能够增加依达拉奉进入脑内的含量;通过MWM分析小鼠的学习记忆能力,结果显示Eda-HBMVECs-Ex显著降低了逃避潜伏期,增加了小鼠在第六天的穿越平台次数。结论HBMVECs-Ex是一种分散性良好,粒径均一的纳米级囊泡,具有改善Aβ诱导的AD小鼠学习记忆能力的功能。其机制可能是通过调节BBB上P-gp的表达,提升脑内Aβ的清除效率,以达到保护神经元功能的作用。Eda-HBMVECs-Ex充分发挥HBMVECs-Ex作为一种纳米载体的功能,装载Eda协助其进入小鼠脑内,使Eda在脑内累积,进一步发挥其脑保护作用,实现Eda与HBMVECs-Ex的双重保护治疗,能改善AD小鼠的学习记忆能力。