【摘 要】
：
目的探讨miR-30a-5p在胃癌细胞SGC-7901增殖及侵袭中发挥的作用,阐明其具体调控机制。方法RT-PCR检测组织及细胞系中miR-30a-5p表达,采用siRNA（miR-30a-5p mimics、Negative Control、miR-30a-5p inhibitor、inhibitor Negative Control）建立miR-30a-5p敲除及过表达模型,CCK-8、划痕实
论文部分内容阅读
目的探讨miR-30a-5p在胃癌细胞SGC-7901增殖及侵袭中发挥的作用,阐明其具体调控机制。方法RT-PCR检测组织及细胞系中miR-30a-5p表达,采用siRNA（miR-30a-5p mimics、Negative Control、miR-30a-5p inhibitor、inhibitor Negative Control）建立miR-30a-5p敲除及过表达模型,CCK-8、划痕实验、transwell实验验证miR-30a-5p在胃癌增殖及侵袭中发挥的作用。应用RT-PCR及Western Blot实验验证miR-30a-5p与上皮间充质转化（EMT）相关标志物mRNA及蛋白相对表达水平,采用生物信息学分析软件预测miR-30a-5p下游靶点,并通过双荧光素酶试验证实miR-30a-5p与波形蛋白（Vimentin）之间的靶点关系。结果1.研究发现,胃癌组织及胃癌细胞中miR-30a-5p表达降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。2.CCK-8实验表明:miR-30a-5p inhibitor（I）组细胞抑制率明显低于inhibitor Negative Control（IC）组,miR-30a-5p mimics（M）组细胞抑制率强于Negative Control（NC）组,差异有统计学意义（P＜0.05）。3.划痕实验表明:I组细胞移动间距明显大于IC组,M组细胞移动间距明显小于NC组;Transwell侵袭实验表明Ⅰ组穿膜细胞数明显多于IC组,M组少于NC组,差异有统计学意义（P＜0.05）。4.RT-PCR和Western Blot表明:miR-30a-5p下调后,Vimentin表达增高,E-cadherin表达降低,上调后结果相反;表明miR-30a-5p上调抑制SGC-7901细胞EMT过程,沉默后促进EMT过程,差异有统计学意义（P＜0.05）。5.双荧光素酶实验表明:Vimentin是miR-30a-5p的直接靶点,miR-30a-5p可直接与Vimentin的3’-UTR相结合。6.进一步验证miR-30a-5p与Vimentin之间的关系机制:CCK-8实验表明,与对照组相比,miR-30a-5p+Vimentin组细胞抑制率降低;Transwell实验表明miR-30a-5p+Vimentin组穿膜细胞数明显多于对照组;Western Blot实验表明miR-30a-5p+Vimentin组Vimentin蛋白相对表达水平明显高于对照组;表明Vimentin上调能够逆转miR-30a-5p对SGC-7901增殖、侵袭的抑制作用,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论miR-30a-5p靶向Vimentin抑制胃癌增殖、侵袭,并参与胃癌EMT进程,且上调Vimentin后可逆转miR-30a-5p对胃癌增殖及侵袭的抑制作用,为胃癌治疗提供了新靶点。
其他文献
目的:通过检测特应性皮炎患者外周血中Th9（T helper cell 9）、白介素-9（Interleukin-9）的水平,分析Th9和白介素-9在特应性皮炎（Atopic dermatitis,AD）患者发病过程中发挥的作用,探讨Th9和IL-9与AD发病机制及疾病严重程度的关系。方法:选取滨州医学院附属医院皮肤病与性病科门诊2018年9月—2019年9月确诊为特应性皮炎患者38例（以12周岁
背景:肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,cc Rcc）是肾细胞癌（Renal cell carcinoma,Rcc）中最常见的病理组织学亚型。仅2019年在中国就有大约6,0000人被确诊为Rcc,其中超过2,0000人死亡。局限性和局部进展性cc Rcc患者的首选治疗方式是手术切除。蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子（cancerous inhibitor o
目的研究肝吸虫感染所致的肝纤维化中NK细胞的作用变化,深入了解肝吸虫对宿主免疫反应的调节机制,为抗肝吸虫所致的肝纤维化的治疗提供新思路。方法将100只BALB/c小鼠随机分为2组:实验组小鼠给予肝吸虫囊蚴灌胃感染,对照组小鼠给予灌胃等量生理盐水。在感染后第1w、4w、7w,10w和14w处死小鼠,无菌分离小鼠肝脏、脾脏和外周血。观察BALB/c小鼠肝脏和脾脏的形态学变化。Masson染色法观察小鼠
背景:神经胶质瘤是人类颅脑中极为常见的肿瘤类型,它是一种恶性肿瘤,约占中枢神经系统恶性肿瘤的80%,尽管外科手术、放射疗法和化学疗法在治疗胶质瘤方面已取得了一些进展,但由于其具有侵袭性强、易转移并且易对药物产生抗药性的特点,导致胶质瘤患者预后差,总体生存率低。因此,为了能够改善胶质瘤患者目前的治疗现状,提高患者的预后以及延长生存时间,这就需要我们进一步寻找治疗胶质瘤的新靶标。最近几年,各种不同于以
近年来,观点动力学成为了网络科学研究的热点之一,吸引了来自控制科学,社会心理学和经济学等多个领域研究者的广泛关注。其根据合理的数学模型来分析和预测群体交互过程中的观点演化过程。通过定量的分析,观点动力学能够帮助学者们验证社会心理学的理论成果,捕捉现实世界的各种社会现象。为了更加深入地研究观点演化过程,本文在表达和私人观点动力学模型（EPO模型）的基础上,针对不同问题间的相互联系,提出了多维表达和私
随着化纤涤纶长丝行业的迅猛发展,生产企业的自动化、信息化和智能化水平大大提升,对产品质量管理的要求日益增长。如何对丝锭质量数据进行采集和处理,分析预测质量信息,及时反馈并指导生产改进,成为了近年来的一个研究热点。本文对丝锭质量数据进行分析处理,利用机器学习、深度学习等方法建立数据挖掘模型,提取关键质量信息。主要的研究内容和成果如下:对进行丝锭质量分析的数据进行采集,主要包括生产过程数据、物流过程数
目的:分析合并椎体内裂隙征的骨质疏松性椎体骨折患者临床症状与影像学表现之间的关系。方法:该临床研究的实施符合滨州医学院附属医院对研究的相关伦理要求,患者及家属均签署知情同意书。回顾分析168例单节段合并椎体内裂隙征的骨质疏松性骨折患者的临床资料,采用目测类比评分法和Oswestry功能障碍指数进行评估,同时记录迟发性神经功能损害的情况。采用X射线测量局部后凸角、椎体不稳定,通过CT判定椎体后壁骨折
目的比较丙泊酚和七氟烷对甲状腺癌根治术患者围术期免疫功能的影响,寻找对甲状腺癌围术期免疫功能抑制较轻的麻醉药物,减少术后复发与转移,为临床优先用药选择提供依据。方法选择我院择期行甲状腺癌根治术的成人患者68例,美国麻醉医师协会（American Society of Anesthesiologists,ASA）Ⅰ-Ⅱ 级,年龄 20-70 岁,按照随机数字表法将患者随机分为A、B两组,每组各34名
目的:通过γ-促分泌酶抑制剂阻断毛细支气管炎小鼠体内的Notch信号,观察小鼠肺组织的病理学表现、检测各组小鼠体内Th9相关细胞因子和蛋白的变化,并研究其与毛细支气管炎发病机制的关系,为毛细支气管炎的治疗提供新思路。方法:选取雄性SPF级Balb/c小鼠30只,随机分为3组（正常对照组、γ-促分泌酶抑制剂组简称实验组、毛细支气管炎组简称RSV组）,每组10只。RSV组应用RSV病毒建立毛细支气管炎
目的:基于TCGA和GEO数据库,分析三阴性乳腺癌（TNBC）的发生及预后相关的关键基因,本文旨在找出可能影响三阴性乳腺癌进展的潜在分子靶向目标,为临床治疗提供策略,改善患者预后。方法:本研究使用“breast cancer”为关键词,在公共数据库癌症基因组图谱数据库（TCGA）中进行搜索并下载与乳腺癌患者临床表现以及mRNA表达谱有关的信息。通过R语言预处理以后,对三阴性乳腺癌患者进行确定,以此