【摘 要】
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目的微量元素锌缺乏是导致精子活力低下的重要原因之一,研究旨在探讨精液中添加锌改善精子活力的机制,探究G蛋白偶联受体39（G protein-coupled receptor 39,GPR39）在微量元素锌影响精子活力中的作用。方法选取2021年7月至2021年12月邢台不孕不育专科医院精液标本40例,其中弱精子症精液标本20例（PR+NR＜40%和PR＜32%）,正常精液标本20例（PR+NR≥4
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目的微量元素锌缺乏是导致精子活力低下的重要原因之一,研究旨在探讨精液中添加锌改善精子活力的机制,探究G蛋白偶联受体39（G protein-coupled receptor 39,GPR39）在微量元素锌影响精子活力中的作用。方法选取2021年7月至2021年12月邢台不孕不育专科医院精液标本40例,其中弱精子症精液标本20例（PR+NR＜40%和PR＜32%）,正常精液标本20例（PR+NR≥40%和PR≥32%）。将精液各分为两份,其中一份加入的锌离子含量为50μg/m L,另一份不做处理,1小时后CASA测定精子参数。根据补锌实验后精子活力的变化将弱精子症精液分为弱精活力升高组（AP组,12例）和弱精活力未影响组（AN组,8例）,正常精液分为正常活力升高组（CP组,10例）和正常活力未影响组（CN组,10例）。各组随机选取6例进行后续实验。微量元素分析仪检测精浆锌的水平;锌离子探针联合激光共聚焦检测精子中的游离锌的表达;免疫荧光染色观察GPR39在精子中的表达位置;q PCR检测精子中GPR39、AQP3、AQP7、MT1、MT2的m RNA表达量;ELISA检测精浆中SOD和MDA水平。结果1向精液中添加锌前,正常精液和弱精子症精液的精浆锌水平无差异（P＞0.05）,但补锌干预后精浆锌水平均显著上升（P＜0.05）。2补锌干预后弱精子症精子游离锌在精子头部和精子尾部荧光增强,正常精子无明显变化。3比较锌转运蛋白家族9个锌转运蛋白和10个锌铁转运蛋白的m RNA的表达量,补锌干预后锌转运蛋白家族表达量没有明显变化（P＞0.05）。4 GPR39在精子中广泛表达,主要定位在精子头部、精子尾部颈中段。5正常精液:与未补锌相比,补锌干预后CP组精子中GPR39和AQP7的m RNA表达量升高（P＜0.05）,精浆中MT1水平升高（P＜0.05）。6弱精子症精液:与未补锌相比,补锌干预后AP组精子中GPR39和AQP7的m RNA表达量升高,精浆中SOD水平升高（P＜0.05）;与未补锌相比,补锌干预后AN组精子中AQP3和AQP7的m RNA表达量升高（P＜0.05）。7与未补锌相比,各组补锌干预后精子中MT2的m RNA表达量和精浆中MDA水平差异无统计学意义（P＞0.05）。结论GPR39、AQP7、MT1和SOD等在补锌干预后改善精子活力方面有重要作用,但在改善正常精子功能和弱精子症精子功能的机制有不同。在正常精子中,Zn2+主要通过GPR39介导AQP7促进了精子MT1的水平从而改善精子活力。而在弱精子症精子中,主要通过GPR39介导AQP7调节精浆SOD水平改善精子活力。图11幅;表6个;参130篇。
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