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目的:急性T淋巴细胞白血病(acute T lymphocytic leukemia,T-ALL)是来源于T淋巴母细胞的血液系统恶性克隆性疾病,因化疗疗效差、常规治疗易复发,同时易发生中枢神经系统白血病成为临床治疗的难题,国内外近期研究发现,在T-ALL患者中,表现出明显的c-myc基因成瘾性,在抑制c-myc水平后,可以有效地缓解肿瘤进展。近年来对溴结构域蛋白(BRD)的研究发现,其抑制剂(JQ1)可以明显抑制c-myc基因,对多种肿瘤有抑制及杀伤作用,包括有慢性髓系白血病、卵巢癌、恶性胶质瘤、肺腺癌等。本课题组在前期的研究中也发现JQ1可以明显降低肿瘤细胞中c-myc基因的表达水平,从而对BCR-ABL基因阳性的急性B淋巴细胞白血病株有明显的治疗效果。因此,JQ1对来源于胸腺祖细胞的T系急性淋巴细胞白血病,是否具有同样的抑制作用,它的机制又是如何是本研究重点。本研究旨通过JQ1干预体外培养急性T淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat细胞株),观察细胞增殖抑制、凋亡作用,同时检测NOTCH通路上Notch1、c-myc、PTEN基因表达情况,探讨JQ1可能的抗T-ALL可能机制,为T-ALL的治疗提供一条新的思路,并为临床应用提供理论基础。方法:1四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测JQ1作用于Jurkat细胞株的增殖抑制率;2流式细胞术检测Jurkat细胞的凋亡率改变;3实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Notch1、c-myc、PTEN mRNA的表达。结果:1.MTT检测结果示:Jurkat细胞株和不同浓度的JQ1共同培养48h、72h、96h后,不同浓度JQ1对Jurkat细胞株增殖有明显的抑制作用,且实验组的细胞增殖抑制率随药物浓度增加、作用时间延长而升高,呈时间-剂量依赖性。JQ1在48 h的半数抑制浓度(IC50)为2.67μmol/L。2.流式细胞术检测结果示:不同浓度JQ1干预Jurkat细胞48h、72h后,经荧光染色流式细胞仪检测,结果显示48 h时间点对照组早期凋亡率为(1.41±0.06)%,而观察组JQ1在0.8、1.6、4μmol/L浓度时早期凋亡率分别为(20.9±0.67)%、(25.27±0.32)%、(32.70±0.93)%;而72 h对照组早期凋亡率为(16.50±0.46)%,实验组JQ1不同浓度组分别为(26.43±0.72)%,(39.67±0.64)%,(61.23±1.15)%。通过统计学单因素方差分析,同一时间点各浓度组有显著差异,相同浓度组细胞凋亡率随时间延长明显增加,与对照组相比较有统计学意义,表现为时间-剂量依赖性(时间效应线性趋势的F=373.845,P<0.001,剂量线性趋势的F=505.763,P<0.001)。3.实时荧光定量PCR检测结果示:不同药物浓度处理Jurkat细胞48h后,RT-PCR检测Notch1、c-Myc和PTEN相关基因的溶解曲线呈单一扩增曲线,特异性较好。结果显示各观察组Notch1、c-myc基因表达量较对照组显著下降,而PTEN mRNA表达量明显增加,且随药物浓度增加基因表达量变化趋势明显(F值分别为1624.83、823.82、4460.76,P值均<0.001),组间有显著统计学差异(P<0.05)。结论:1.JQ1可以明显抑制Jurkat细胞增殖,并呈时间及剂量依赖性;2.JQ1可以有效诱导Jurkat细胞的凋亡,其凋亡效应也呈时间及剂量依赖性;3.JQ1可以明显抑制Jurkat细胞中NOTCH通道相关基因:Notch1基因、c-myc基因,同时上调PTEN基因的表达,提示JQ1作用于Jurkat细胞靶点之一可能是通过NOTCH信号通路发挥作用。