皮肤类器官的构建及大面积皮肤损伤的修复研究

来源 :长春理工大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:ahhfwwzy
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皮肤是人体的第一道屏障,当皮肤受到严重的损伤,如烧伤会损害其再生能力,还存在感染、慢性溃疡、器官衰竭等风险,甚至危及生命。因而皮肤损伤修复对保证人体健康具有重要意义。目前临床上对于创伤的修复采用的是皮肤替代物的移植,其中具有生理相关性的皮肤替代物可以更好的促进创面的修复。皮肤类器官是一种体外的3D模型,它是具有与皮肤组织相似结构和功能的类组织器官。在皮肤组织修复和皮肤再生的过程中与表皮干细胞的关系最为密切,所以在本研究中,我们从样本中分离提取得到具有干性潜能的表皮干细胞,再利用表皮干细胞通过三维培养的方式构建皮肤类器官,对类器官进行切片染色,并与正常的皮肤组织结构进行对比,结果显示我们构建的皮肤类器官有一定的皮肤结构。分别将皮肤类器官、2D培养的表皮干细胞移植于大面积皮肤损伤的小鼠模型的伤口中,以不加细胞或类器官组作为阴性对照,观察类器官和表皮干细胞对创伤修复的作用。结果显示,与阴性对照组相比,移植皮肤类器官组与2D培养的表皮干细胞组,在创面修复前期有促进创面闭合的作用。本研究中进一步收集创面组织,利用H&E染色、免疫组化、RT-PCR等方法,对伤口处的再表皮化和附属器官修复情况进行统计比较。结果显示,在第21天与移植了2D培养的表皮干细胞组和阴性对照组相比,移植皮肤类器官组的创面率先完成了表皮化,且形成了具有角质细胞层的皮肤组织结构。在第21天,移植皮肤类器官组创面修复处再生的毛囊和皮脂腺数量显著高于2D表皮干细胞组和阴性对照组。且在第21天移植皮肤类器官组中毛囊增殖相关因子HGF、FGF2在m RNA的表达水平上显著高于2D表皮干细胞组和阴性对照组。在体外表皮干细胞和成纤维细胞迁移的实验中,加入皮肤类器官的条件培养基组与加入2D培养的表皮干细胞的条件培养基组和阴性对照组相比,更快的促进了细胞的迁移。综上,移植皮肤类器官可以促进创面的表皮化,并可以在一定程度上促进创面附属器官的修复。
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