鼻咽癌相关新基因的克隆与鉴定

来源 :中山医科大学 中山大学中山医学院 中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jovin_chow
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克隆、鉴定鼻咽癌相关基因不仅能从基因水平探索鼻咽癌的发生、发展过程,而且能为临床应用找到新的突破口.现已发现鼻咽癌有明显遗传倾向,也有许多鼻咽癌相关的染色体改变被发现,但已知基因与鼻咽癌的关系并未明确,故鉴定克隆鼻咽癌相关新基因具有独特的意义.利用细胞基因表达的差异,可以探究造成细胞表型差异的遗传原因,所以,利用消减杂交技术建立的鼻咽癌组织与正常鼻咽组织的消减cDNA文库是筛选、克隆、鉴定鼻咽癌组织的差异表达基因的很好工具.最后,利用基因芯片技术筛选出了417个差异表达基因和基因片断,为研究鼻咽癌相关新基因的功能和克隆新的鼻咽癌相关基因打下良好的基础.结论:1).选出的两个阳性克隆(NP5、NP9)在消减池中有明显差异,表明抑制消减杂交的效果是可靠的,筛选出的阳性克隆是可信的.2).十个序列清晰的阳性克隆,八个为已知基因,两个是新基因.3).新基因NP9无论是在鼻咽癌细胞系中,还是在鼻咽癌组织中均为下调表达,而在多种人体正常组织中都有表达,提示它是抑癌基因,其mRNA长度为3 kb的单一剪接体.4).同源EST克隆的序列与NP9原序列完全一致,证实此基因的确切性.5).基因芯片技术为筛选差异表达基因提供了简捷、可靠的方法,所获得的cDNA片段是后续克隆新的鼻咽癌相关基良好基础.
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