研究背景随着生活方式的改变和人口平均寿命的增长,冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）已经成为全球范围内高患病率、高死亡率的慢性病之一。《中国心血管健康与疾病报告2020》显示,我国心血病患者人数已超过2.9亿,其中冠心病患者约有1139万,且中国冠心病患病率处于持续上升阶段,年增长率高达20%,冠心病是目前中国人群第二位死亡原因,同时也是目前导致早死的第二大疾病。冠状动脉粥样硬化是导致冠心病发生发展的主要原因,其中低密度脂蛋白胆固醇（Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）是动脉粥样硬化最主要的危险因素。然而,冠心病患者经过积极的生活方式改善、降脂治疗、血压管理及抗血小板治疗后仍然存在较高的剩留心血管病风险。研究发现,心血管疾病风险的大小取决于循环中脂蛋白胆固醇颗粒数目的多少,国内外相关指南一直将LDL-C作为判定心血管发病风险和评估降脂治疗的首要目标,但是患者即使积极地应用他汀类药物甚至是PCSK9抑制剂,使LDL-C达标,甚至将LDL-C控制在30 mg/dL,仍有一部分人群发生了不良心血管事件。提示除胆固醇之外,其它的危险因素可能也参与了冠心病。因此,寻找LDL-C水平升高以外的危险因素,从而降低剩留心血管病风险是目前冠心病防治领域的关键。蛋白质的β-折叠是蛋白质发挥功能、参与生命活动的最基本结构之一,但是富含β-折叠的错误折叠蛋白可以导致细胞功能异常甚至死亡。错误折叠蛋白在神经退行性疾病发病机制中的研究由来已久。X射线衍射分析发现ApoB中富含的β-折叠与阿尔茨海默病Aβ的光谱学特征,同是能够沉积并导致疾病的反向平行β-折叠结构。近年来已有在糖尿病等多种代谢性疾病中发现富含β-折叠的错误折叠蛋白报道,诸如糖尿病胰岛病变（胰岛淀粉样多肽）,提示错误折叠蛋白可能在糖尿病、动脉粥样硬化等代谢性疾病的发生发展中发挥着重要作用。有研究表明,由于低密度脂蛋白受体（LDLR）存在细胞内胆固醇水平的负反馈调节机制,初始的LDL-C并不会造成巨噬细胞的泡沫化,即不会启动动脉粥样硬化。但当LDL-C发生氧化修饰以后,细胞内胆固醇水平的负反馈调节消失,修饰后的LDL-C不断被巨噬细胞摄取,在细胞内过量积聚从而形成泡沫细胞。ApoB-100是LDL的主要结构蛋白。ApoB-100的二级结构分析显示其呈五边形结构,由交替的α-螺旋（α-helix）和β-折叠（β-sheet）结构域组成。apoB-100的β-折叠区域是维持LDL颗粒完整性的关键结构区域,其α2结构域在LDL-C氧化修饰过程中从α-螺旋向β-折叠转化,导致β-折叠含量增多。圆二色谱分析表明,参与动脉粥样硬化的LDL-C的α-螺旋含量（33.5%）显著低于天然LDL-C（93.2%）,而氧化修饰后的LDL-C的β-折叠含量（16.4%）显著高于天然LDL-C（6.2%）。因此,LDL-C中β-折叠的含量可以反映其修饰水平。傅里叶变换红外光谱（Fourier Transform infrared spectroscopy,FT-IR）技术结合层次聚类分析（Hierarchical cluster analysis,HCA）技术发现,ApoE-/-/LDLR-/-小鼠动脉粥样硬化管壁组织中蛋白质二级结构发生改变,其构象中β-折叠的含量明显增加,尤其是病变斑块和中膜区域,而α-螺旋的含量普遍下降,提示病变区域存在大量不能被清除的错误折叠蛋白。因此,我们推测血清蛋白质β-折叠水平升高可能是致动脉粥样硬化的危险因素,冠心病患者血清蛋白质β-折叠水平升高,富含β-折叠的LDL-C沉积促进了冠心病的发生和发展。本研究将在临床水平探讨血清蛋白质β-折叠水平与冠心病的相关性,分析影响血清蛋白质β-折叠水平的各种危险因素。研究目的（1）在临床水平探讨血清蛋白质β-折叠水平与冠心病的相关性;（2）分析影响血清蛋白质β-折叠水平的各种危险因素。研究方法选取山东大学齐鲁医院于2018年6月～2019年6月收治的223例冠心病患者（至少1支或以上主要冠状动脉直径狭窄≥50%）和同期在山东大学齐鲁医院接受健康体检的56例正常人群作为研究对象。收集两组性别、年龄、血压、心率、体重指数,有无吸烟、饮酒、高血压、糖尿病、高脂血症、既往心肌梗死等,完善体格检查及血液标本的留取。检测实验室检查指标,包括:总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、小而密低密度脂蛋白胆固醇、尿素氮、血肌酐、谷丙转氨酶等指标;采用硫磺素T（Thioflavin T,ThT）染色检测血清蛋白质β-折叠水平。应用SPSS 24.0软件进行统计学分析。研究结果（1）与正常对照组相比,冠心病组男性、收缩压、舒张压、BMI、吸烟史率、饮酒史率、高血压病史率、糖尿病病史率、高脂血症病史率及白细胞计数、红细胞计数、ALT、TG、sdLDL-C、ALB、PA、Glu、Cr、Hcy、UA、cTnI显著升高,差异均具有统计学意义（P＜0.05～0.01）;而心率、TC、VLDL、HDL-C、LDL-C、C1q、LDH 较对照组降低,差异均具有统计学意义（P＜0.05～0.01）。（2）与正常对照组相比,冠心病组血清ThT荧光强度明显增加,差异具有统计学意义（P＜0.001）;且分别经TC、LDL-C和sdLDL-C校正后,冠心病组的荧光强度均显著高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05～0.01）。去除白蛋白的荧光影响后,冠心病组的荧光强度仍显著高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;分别经TC、LDL-C和sdLDL-C校正后,冠心病组的荧光强度均显著高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05～0.01）。以上结果表明,冠心病患者血清蛋白质β-折叠的含量增加。（3）冠心病患者血清蛋白质β-折叠水平与腰臀比（β=2.636,P＜0.001）、年龄（β=0.014,P＜0.001）、心率（β=0.007,P＜0.001）、舒张压（β=0.004,P＜0.05）、高血压病史（β=2.332,P＜0.001）、吸烟史（β=2.054,P＜0.001）、糖尿病病史（β=1.204,P＜0.001）、高脂血症病史（β=1.078,P＜0.01）、冠心病家族史（β=1.149,P＜0.01）及 HbA1C（β=0.511,P＜0.001）、LDL-C（β=0.216,P＜0.01）、Na（β=0.026,P＜0.001）、WBC（β=0.037,P＜0.01）和LDH（β=0.001,P＜0.05）水平呈正相关,差异均具有统计学意义。（4）血清蛋白质β-折叠水平（OR=27.28,P＜0.01）、性别（OR=2.830,P＜0.05）、收缩压（OR=1.057,P＜0.001）、TG（OR=15.926,P＜0.001）、Glu（OR=1.545,P＜0.05）、Hcy（OR=1.105,P＜0.05）均与冠心病发展有关,是冠心病的危险因素。而C1q（OR=0.972,P＜0.001）是冠心病的保护因素。以上结果说明,血清蛋白质β-折叠水平是冠心病患者的独立危险因素。结论（1）冠心病患者中血清蛋白质β-折叠水平明显升高;（2）有高血压病史、吸烟史、糖尿病病史、高脂血症病史、冠心病家族史的冠心病患者在年龄、舒张压、腰臀比增加、心率增快及血HbA1C、LDL-C、Na、WBC、LDH水平升高的情况下,更容易出现血清蛋白质β-折叠水平升高;（3）血清蛋白质β-折叠水平升高是冠心病的独立危险因素,并且血清蛋白质β-折叠的作用独立于LDL-C。