本课题为第四军医大学西京医院药剂科与陕西方舟制药有限公司的合作研究项目。枸杞为茄科枸杞属植物，主要分布于我国西北、西南、华中、华南和华东各省，并且各地均有栽培。枸杞子为枸杞的成熟果实，为我国传统中药材，具有提高免疫力、抗氧化、清除自由基等药理作用，主要用于肿瘤以及一些老年疾病如糖尿病、动脉粥样硬化等的辅助治疗。目前对枸杞子中活性成分作为有效部位的药用开发较少，且对其单体成分的分离鉴定等研究也缺乏系统性。本课题的研究主要分为两个部分：一、宁夏枸杞子中活性成分的药用开发1.以枸杞多糖为有效部位开发医院制剂根据文献报道，枸杞多糖对糖尿病有较好的防治作用。本课题对枸杞子中总多糖进行提取纯化，结合传统的水提醇沉提取法并进一步优化，得到纯度较高的枸杞多糖作为有效部位。对得到的枸杞多糖进行制剂工艺的研究，制成胶囊剂，命名为枸杞多糖胶囊。随后进行相关的药效学验证，建立质量标准，对胶囊进行稳定性试验及急性毒性试验，设计临床试验方案等。将以上试验数据汇总整理，已申请获得军队医疗机构制剂临床研究批件。2.宁夏枸杞子中总黄酮的提取纯化工艺研究目前对枸杞子总黄酮的分离纯化主要采用的是大孔吸附树脂色谱法，但此法所得到的总黄酮纯度较低，效率较差。本课题在文献报道的基础上，采用大孔吸附树脂色谱联用聚酰胺色谱的方法，对枸杞总黄酮进行纯化。通过考察工艺的影响因素，确定了最佳工艺条件，最终得到的总黄酮富集物的纯度为42.8%，并将此方法申请了中国发明专利。二、宁夏枸杞子的抗氧化活性成分研究采用现代色谱（硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及HPLC制备等）及波谱（NMR、MS等）技术对宁夏枸杞子中的单体成分进行分离鉴定。用85%乙醇提取后，从乙酸乙酯萃取层中分离获得21个成分，已鉴定了其中15个的结构，包括7个酚酰胺类化合物：N-E-coumaroyl tyramine (1)，dihydro-N-caffeoyltyramine (2)，trans-N-caffeoyltyramine (3)， N-E-feruloyl tyramine (4)， lyciumamide A (5)，lyciumamide B (6)和lyciumamide C (7)；1个黄酮类化合物：槲皮素(15)；2个酚酸类化合物：顺式对羟基肉桂酸(11)和反式对羟基肉桂酸(12)；2个香豆素类化合物：东莨菪素(13)和异莨菪亭(14)；烟酰胺(10)；1个亚苄基苯乙酮衍生物：artamenone(8)；1个生物碱类化合物：2-furylcarbinol-(5’-11)-1,3-cyclo-pentadiene[5,4-c]-1H-cinnoline (9)。其中，化合物5~7为未见报道的新化合物，化合物1，4，8和9亦为首次从枸杞属植物中分离得到。采用DPPH自由基清除法及抑制抗坏血酸盐/Fe2+，CHP或CCl4/NADPH在鼠肝微粒体产生脂质体过氧化的试验，对酚酰胺类化合物1和4~7进行抗氧化活性测试。结果表明：所有化合物均表现出较强的抗氧化活性，其中以化合物1和4的活性最强。课题创新性及研究意义：1.对枸杞子中的重要活性成分枸杞多糖进行了分离纯化及药效学的验证，证实了它对糖尿病的防治作用，并在此基础下，将其作为有效部位开发成医院制剂──枸杞多糖胶囊。2.采用大孔吸附树脂色谱联用聚酰胺色谱的方法纯化了宁夏枸杞子中的总黄酮。通过考察工艺的影响因素，确定了最佳工艺条件。此法远优于单一运用这两种色谱进行纯化的方法，联合发挥了大孔吸附树脂和聚酰胺色谱的优势，提高了总黄酮的纯度。3.对枸杞子中的化学成分进行分离鉴定，得到21个化合物，已鉴定了15个的结构，包括7个酚酰胺类化合物1~7。其中，化合物5~7为3个新化合物，化合物1，4，8和9亦为首次从枸杞属植物中分离得到。3个新化合物为酚酰胺类二聚体及其衍生物，结构具有一定的新颖性。枸杞属植物中存在一定量的酚酰胺类成分，但多从地下部分分离得到，在果实中并未见此类成分的报道。本课题所鉴定的二聚体结构类型在枸杞属植物中尚属首次报道。这些研究结果扩充了对枸杞属植物化学成分的认识，并对枸杞属植物的化学分类学具有一定的意义。4.酚酰胺类化合物1和4~7显示较强的抗氧化活性，且以化合物1和4的活性最强。通过与文献报道的枸杞子中其他抗氧化物质（多糖类、黄酮类、类胡萝卜素）的活性比较，发现酚酰胺类化合物与它们的抗氧化作用相近，应该在枸杞子的抗氧化活性中发挥重要作用，从而为枸杞子的抗氧化活性物质增添了新的结构类别。