目前,从天然产物中提取分离的单组分物质是抗肿瘤药物的重要来源,已广泛应用于肿瘤的治疗。蛹虫草是天然的药食兼用真菌,类似于名贵中药冬虫夏草,具有广泛的药理活性,虫草素是其重要的活性组分之一,但虫草素进入体内容易被腺苷脱氨酶降解为无活性的物质,使其药效大大降低。为了解决虫草素在体内易降解的问题,通过炮制蛹虫草,研究蛹虫草汤剂理化性质,初步探究其抑制肿瘤作用机制,为虫草素的开发利用提供参考。本文通过中药炮制方法制备了蛹虫草汤剂,采用酶标仪测定蛹虫草炮制过程汤剂吸光值变化,原子力显微镜观察蛹虫草汤剂体系颗粒物,激光粒度仪测定汤剂体系颗粒数量、粒径、均一度和体系Zeta电位,液相色谱法测定汤剂体系物质及虫草素含量变化。实验结果表明,蛹虫草炮制过程发生美拉德反应,形成纳米级颗粒,炮制60min汤剂体系最稳定、颗粒数量最多、颗粒集中分布：蛹虫草汤剂体系呈现pH值响应,汤剂随pH值的变化胶体颗粒具有包埋和释放分子的能力。采用MTT法探究蛹虫草汤剂和虫草素对人不同肿瘤细胞(肝癌细胞HepG-2、肾癌细胞NCI和白血病细胞K562)和小鼠肝癌细胞H22细胞毒性作用,并对人肝癌细胞HepG-2和小鼠肝癌细胞H22增殖抑制作用试验。实验结果表明,蛹虫草汤剂和虫草素对HepG-2、NCI、K562和H22肿瘤细胞均有不同程度的抑制作用；对人肝癌HepG-2细胞和小鼠肝癌H22细胞具有生长抑制作用,并呈现明显的剂量和时间依赖性,作用时间越长或浓度越高抑制效果愈好。蛹虫草汤剂对肿瘤细胞的抑制效果好于好于纯虫草素。采用倒置显微镜、吉姆萨染色或瑞氏.吉姆萨染色、吖啶橙/溴化乙锭染色法等观察细胞形态结构,琼脂糖凝胶电泳分析肿瘤细胞DNA降解情况,流式细胞仪分析细胞周期和胞内游离钙离子含量。实验结果表明,蛹虫草汤剂和虫草素均能诱导人肝癌细胞HepG-2和小鼠肝癌细胞H22形态结构呈现一系列凋亡特征,DNA电泳图谱呈现典型的DNA ladder条带,细胞周期阻断在G2/M期,其中H22细胞出现“亚G1期”峰即凋亡峰,细胞内游离钙离子浓度升高。蛹虫草汤剂和虫草素对人肝癌HepG-2细胞和小鼠肝癌H22细胞的抑制作用是通过诱导促进细胞凋亡的途径来实现,蛹虫草汤剂诱导肿瘤细胞凋亡效果好于纯虫草素。构建小鼠肝癌H22实体瘤和腹水瘤小鼠模型,观察蛹虫草汤剂和虫草素对小鼠肿瘤的抑制作用,通过小鼠脾脏指数和胸腺指数反应其对免疫器官的影响,采用苏木精-伊红染色观察肿瘤组织病理形态的变化。实验结果表明,蛹虫草汤剂和虫草素对小鼠肝癌H22实体瘤具有不同程度的抑制作用,均能增强小鼠的免疫力,但蛹虫草汤剂作用效果好于虫草素；实体瘤组织呈现凋亡病理学特征；对小鼠肝癌H22腹水瘤生存寿命有一定的延长作用,并对肿瘤小鼠无明显的毒副作用,汤剂作用效果略好于虫草素。蛹虫草汤剂通过诱导H22肿瘤细胞凋亡和增强肿瘤小鼠免疫力进行体内抗肿瘤抑制作用,但蛹虫草汤剂作用效果好于虫草素。综上所述,蛹虫草炮制汤剂是一个美拉德反应胶体体系,形成的胶体颗粒稳定了虫草素的结构,使其在体内不容易被降解。蛹虫草汤剂抗肿瘤作用效果好纯虫草素,蛹虫草汤剂在一定程度上提高了虫草素的药效。