怀地黄块根的发育与有效成分的积累关系及其道地性形成机制的研究

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地黄[Rehmannia glutinosa (Gaertn.)Libosch.]隶属于玄参科(Scrophulariaceae),其根入药,是我国传统的大宗中药材。自明朝以后,其主产区集中于河南古怀庆府地区(现在的修武、武陟、温县、孟县、博爱等地)。将产于古代怀庆府的地黄,称为怀地黄或怀庆地黄[Rehmannia glutinosa f. Hueichingensis(Chan et Sehih)Hsiao]。地黄的主要药用部分是其地下部分,以鲜地黄、生地黄和熟地黄三种形式分别入药。本文应用植物解剖学、植物化学和组织化学相结合的方法研究了怀地黄药用部分的形态发生和结构发育,测定了梓醇在怀地黄药用部分的积累部位及其在营养器官中的含量和积累动态:并对不同产区地黄块根的外观特征、解剖结构和梓醇含量进行了比较研究:用SPSS10.0软件系统对不同产区的主要生态因子与地黄块根中梓醇的含量进行了相关性分析,在此基础上探讨了怀地黄道地性形成的机制及其规范化栽培中应注意的问题。 研究结果表明:1.用上一年的块根作母根进行繁殖,从母根和母根上不定芽的茎基部分别发生两种类型的不定根:一类不定根在生长发育过程中,通过初生结构的分化和正常的次生生长.产生次生结构。这类根在生长发育过程中增粗不明显,属于担负吸收和固着作用的正常根。另一种类型的不定根,从外形上看,自发生15-20d后,其前端膨大成小球状,30d后,不定根的前端膨大部分成长为直径约6-10mm的圆柱状肉质根,之后,其中部生长较快,两端生长较慢,从而逐渐呈近纺锤状,4-5个月后形成直径达3-9cm的不规则纺锤状块根。从结构上看,这类不定根初生结构的分化和维管形成层的发生与正常根相同,但以后维管形成层的分裂活动与正常根不同。在维管形成层活动早期,维管形成层细胞分裂向内产生的次生木质部和向外产生的次生韧皮部,在根的横切面上所占的比例相近,以后,维管形成层细胞向内产生的次生木质部多,而向外产生的次生韧皮部少,因此,在横切面上随着块根的膨大,木质部所占的比例愈来愈大,而韧皮部所占的比例愈来愈小。同时,在次生木质部中导管较少,而薄壁组织细胞多。次生木质部中的薄壁组织细胞一部分由维管形成层细胞分裂产生,而另一部分由次生木质部内的薄壁组织细胞再分裂产生,从而在次生木质部中呈现出了导管数量少,星散分布在薄壁组织细胞中。在根的横切面上,导管仅占次生木质部的10一15%。由于维管形成层细胞产生大量次生木质部薄壁组织细胞,其中部分薄壁组织细胞又增殖,通过此种异常次生生长活动,使根部迅速增粗,形成两端细中部膨大的近纺锤形块根。2.在怀地黄根、茎和叶三种营养器官中都含有梓醇,但不同器官中梓醇含量有显著差异。其中,茎、叶中梓醇含量较高,块根中梓醇含量较低.在同一营养器官中梓醇积累呈现规律性变化。在幼叶中梓醇含量低,随着叶发育成熟,其梓醇含量逐渐增高;在块根中梓醇含量随着块根的发育增粗逐渐增高;怀地黄块根木质部中梓醇的含量高于韧皮部。3.组织化学定位研究证明,怀地黄块根中梓醇贮存在木质部和韧皮部的薄壁细胞中。电子显微镜观察表明,薄壁细胞在发育早期,细胞质浓,细胞核大,并且含有丰富的细胞器;一段时间后,细胞开始液泡化,在细胞中开始出现小的液泡;之后,小液泡逐渐合并成较大的液泡,一个中央大液泡,在大的液泡中可以看到有黑色沉淀物;最后,液泡逐渐合并成在中央大液泡内,布满了被饿酸固定的黑色沉淀物,发育成熟。4.不同产区地黄块根的外部形态和内部结构存在着差异。薄壁细胞从外观上看,河南新乡和温县产的地黄颜色较深,为黄褐色,而山东平阴、山西襄汾和陕西西安产的地黄颜色较浅,分别为黄色和浅黄色:温县产的地黄为块状,河南新乡、山东平阴、山西襄汾产的地黄均为纺睡状,陕西西安产的地黄为条状;每个地黄块根的平均重量,陕西西安<山东平阴<山西襄汾<河南新乡<河南温县;地黄块根的最粗处直径也是陕西西安<山东平阴<山西襄汾<河南新乡<河南温县;地黄块根的长度与粗度的比值,河南温县<河南新乡<!_自西襄汾<陕西西安<山东平阴。从内部结构上看,仅河南温县产的地黄横切面上有菊花心,而其它产区的地黄均无菊花心;横切面上木质部与韧皮部的比例,陕西西安<山东平阴<山西襄汾<河南新乡<河南温县:木质部中薄壁细胞所占的比例,陕西西安<山东平阴和山西襄汾<河南新乡<河南温县:5.不同产区地黄块根中梓醇的含量也不同,按块根梓醇含量从高到低排序,河南温县>河南新乡>山西襄汾>山东平阴>陕西西安。6.对不同产区的主要生态因子与地黄块根中梓醇的含量的相关性分析表明,在影响梓醇含量的生态因子中,土壤因子的影响大于气候因子。在土壤因子中梓醇的含量与土壤PH值、土壤全氮含量、土壤速效磷含量的相关性都达到了极显著水平(P<0.01),与土壤有机质含量和土壤速效钾含量的相关性也达到了显著水平(P<0.05);在气候因子中,梓醇的含量仅与年平均温度和年积温呈显著的正相关(P<0.05)。 根据研究结果得出以下结论:1.怀地黄的药用部分起源于母根和不定芽茎基部的不定根。在结构上具有典型的根的结构特征,如初生木质部与初生?
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