【摘 要】
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新疆红枣以高营养价值和功能而闻名,富含多种营养物质和生物活性成分。本文采用五种不同方法提取红枣中生物活性物质——黄酮类化合物,比较提取方法对总黄酮含量、黄酮组成及其稳定性的影响,研究芦丁在低共熔溶剂（Deep Eutectic Solvent,简称DES）中的稳定性,为新疆红枣的合理开发利用奠定基础,特别是对红枣黄酮稳定性的深度研究提供理论参考。具体研究内容如下:1.不同提取方法对新疆红枣中黄酮得
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新疆红枣以高营养价值和功能而闻名,富含多种营养物质和生物活性成分。本文采用五种不同方法提取红枣中生物活性物质——黄酮类化合物,比较提取方法对总黄酮含量、黄酮组成及其稳定性的影响,研究芦丁在低共熔溶剂（Deep Eutectic Solvent,简称DES）中的稳定性,为新疆红枣的合理开发利用奠定基础,特别是对红枣黄酮稳定性的深度研究提供理论参考。具体研究内容如下:1.不同提取方法对新疆红枣中黄酮得率的影响。以新疆和田骏枣为原料,尿素为氢键供体,氯化胆碱为氢键受体构建的DES为提取剂,分别采用超声波辅助、微波辅助及酶解辅助进行黄酮的提取,并以传统的热水提取法和乙醇提取法为对照,通过单因素实验及响应面优化实验,确定了各提取方法的最佳提取条件。（1）超声波辅助DES提取法:DES体系二者摩尔比2:1,含水量45%,料液比1:40 g/mL,超声功率为200 W,超声频率35 kHz,超声温度70℃,超声时间44 min,此时黄酮得率为5.79 mg/g;（2）微波辅助DES提取法:DES体系二者摩尔比1:3,含水量34%,料液比1:42 g/mL,微波功率700 w,微波时间160 s,此时黄酮得率为8.03 mg/g;（3）酶解辅助DES提取法:DES体系摩尔比1:3,含水量50%,料液比1:45 g/mL,复合酶1（纤维素酶:果胶酶=2:1 V/V）,酶的添加量14.5 g/mL,pH值为5.10、酶解温度70℃,反应时间3 h,此时黄酮得率为6.85 mg/g;（4）热水提取法:料液比1:45 g/mL,提取时间70 min,提取温度90℃,此时黄酮得率为3.61 mg/g;（5）乙醇提取法:乙醇浓度为40%,料液比1:24.5 g/mL,提取时间48 min,提取温度90℃,此时黄酮得率为5.14 mg/g。不同方法提取的总黄酮含量存在显著差异（P＜0.05）,其中DES提取法优于传统水提法和乙醇提法,尤以微波辅助DES提取法得到的总黄酮含量最高。2.不同提取方法对黄酮组分及其稳定性的影响。针对上述5种提取方法得到的红枣黄酮提取液,分别进行黄酮组分鉴定和稳定性研究。（1）采用液质联用技术（HPLC-MS）鉴定出和田骏枣中的黄酮类化合物主要有15种,包括芦丁、儿茶素、牡荆素、二氢杨梅素、槲皮素3-0-呋喃葡萄糖苷、二氢槲皮素、表儿茶素、槲皮苷、二氢山奈酚、木犀草素、槲皮素、柚皮苷查尔酮、芹菜素、山奈酚、异鼠李素。五种方法提取到的黄酮组分有所差异,各方法的提取物中均以芦丁含量最高。（2）黄酮的稳定性研究。①黄酮粗提物在高温90℃处理2 h后,DES-超声的粗提物热稳定性最好,黄酮保留率最高,为98.15±0.51%。②各黄酮粗提液经21 d室温避光储存,DES-超声法得到的黄酮提取液在21 d期间稳定性最好,黄酮保留率为64.25±2.21%,DES-酶解法得到的黄酮提取液稳定性最差,仅残留30%。③分别经过紫外、自然光辐射和避光保存44 h,紫外光对黄酮粗提液影响最大,黄酮保留率下降最快;避光保存对黄酮影响较小,DES-超声方法提取的黄酮最稳定,黄酮保留率最高,达86.44±2.45%。通过比较不同提取方法的黄酮稳定性,DES-超声提取方法能较好保护黄酮类化合物,因此,DES-超声是一种对和田骏枣较为适宜的提取黄酮类化合物的方法。3.基于DES的芦丁模拟体系稳定性研究。针对骏枣中含量最高的黄酮类物质——芦丁,构建DES模拟体系,研究芦丁在其中的稳定性。（1）确定了稳定芦丁的最佳DES体系为氯化胆碱-尿素,二者摩尔比为1:2,含水量为20%;芦丁浓度在0.28-0.68 mg/mL,随加热温度的升高（30-80℃）,芦丁溶解性增加。（2）以水为溶剂,芦丁在其中加热后,60-90℃下的热稳定性降幅均大于在芦丁-DES体系,表明芦丁在DES体系比水中具有较好热稳定性。（3）辐照时间延长,芦丁在不同溶剂中保留率均降低。而DES中的芦丁保留率均高于水溶法,最高保留率为99.93%±3.37。（4）芦丁溶液在放置57 d后,DES溶解的芦丁保留率下降到44.15±1.10%,而水溶法中芦丁保留率仅为28.81±3.03%。储存期间,DES溶解的芦丁比水溶法保持更好的稳定性。由此可见DES溶解法具有明显优势,对提高芦丁稳定性有重要作用。
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