小麦SPL家族基因TaSPL17的功能研究

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小麦(Triticum aestivum L.)是我国第三大粮食作物,小麦TaSPL17基因是SPL(SQUAMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN-LIKE)基因家族成员之一,与水稻增产基因OsSPL14同源性较高,两者都能被miR156调控,并能下调分蘖相关基因TB1的表达,在植株形态建成方面具有一定作用。因此,在小麦中研究TaSPL17基因的功能,有利于解析小麦株型调控的分子机制,对小麦高产育种工作有重要意义。本研究通过分析小麦基因组TaSPL17基因启动子中的顺式作用元件,预测该基因的部分功能;用独脚金内酯人工合成类似物GR24、生长素IAA和细胞分裂素6-BA处理普通小麦幼苗,分析小麦根部和茎基部Ta SPL17基因对三种激素的响应,研究TaSPL17基因在调控小麦地下部分和地上部分发育中与独脚金内酯、生长素和细胞分裂素间的关系;将miR156识别位点突变的Taspl17基因转化到普通小麦中使其过量表达,分析T0代转基因植株的表型,研究TaSPL17基因在小麦株型调控中的功能;同时本研究对小麦转基因体系进行了优化。取得主要研究结果如下:1.小麦基因组TaSPL17基因启动子序列中含有应答光响应、胚乳和分生组织表达、叶片形态建成、赤霉素、茉莉酸甲酯、脱落酸以及一些应答干旱响应和防御应激信号的顺式作用元件,预测TaSPL17基因在调控小麦植株光学形态建成、胚乳和分生组织分化、叶片生长等株型建成方面具有一定功能,可能参与小麦茉莉酸甲酯、赤霉素、脱落酸等激素信号途径以及一些防御和应激机制。2.在不同浓度的GR24、IAA、6-BA处理下,小麦幼苗根部和茎基部TaSPL17基因的表达量都出现显著下降,说明在小麦苗期根部和茎基部的发育过程中TaSPL17基因的表达可以被独脚金内酯、生长素和细胞分裂素调节。3.构建了含有潮霉素抗性基因(HYG)的pTCK303-Taspl17和含有抗草铵膦基因(BAR)的pGREEN-OE-Taspl17过量表达载体,遗传转化获得了转pGREEN-OE-Taspl17的科农199植株,对T0代转基因小麦进行表型分析,发现TaSPL17基因过量表达能够影响小麦株高和复小穗的发育。4.通过比较分析小麦pTCK303-Taspl17和pGREEN-OE-Taspl17两个重组质粒的遗传转化过程,发现与潮霉素相比,草铵膦对小麦愈伤组织的筛选作用较强、可以提高小麦再生苗的阳性率,大幅度减少工作量。
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