恶性肿瘤易转移、复发、治疗难度大,严重影响人们的生活质量,威胁生命健康。肿瘤的转移是一个复杂的动态过程,涉及多方面因素,不仅包括肿瘤细胞本身的特征,还包括宿主微环境的变化。肿瘤微环境作为一个复杂的微环境,它主要由细胞成分肿瘤细胞和基质细胞以及非细胞成分细胞外基质、趋化因子和细胞因子等组成。肿瘤相关成纤维细胞（Cancer-associated Fibroblast,CAFs）作为肿瘤微环境所占比重最大的一个组成部分,与恶性肿瘤的转移密切相关。因此,深入研究肿瘤相关成纤维细胞激活和维持机制可以为肿瘤转移的早期诊断和治疗提供新的方法。p53^N236S(纯合突变为p53^S/S,人类中为p53^N239S,以下简称p53S),是发生在p53的第七号外显子上的一个错义点突变,即在七号外显子上的第236位密码子由AAT突变为AGT。实验室的前期研究显示,p53^N236S突变使其具备了癌基因潜能。p53^N236S基因敲入小鼠具有肿瘤早发,且多表现为高侵袭性的淋巴瘤和高转移性肉瘤的特征。通过移植瘤实验将鼠源肿瘤细胞皮下注射到WT、p53^-/-和p53^S/S小鼠中,发现肿瘤细胞在p53^S/S小鼠中生长最快,且Brdu掺入和增殖标记物PH3免疫印迹结果证实肿瘤细胞在p53^S/S小鼠中增殖水平最高。提示p53^S/S为肿瘤的生长提供有利的微环境。CAFs是肿瘤微环境的重要组成成分。CAFs相关因子CXCL12,IGF2的RNA水平在p53^S/S小鼠肿瘤组织中表达升高。提示p553S可能促进CAFs激活,进而促进肿瘤生长。我们检测了p53^-/-和p53^S/S自发肿瘤中CAFs相关因子表达,发现相对于p53^-/-自发肿瘤组织,CAFs相关因子CXCL12、CXCL10、CXCL1、CXCR3、TGFB2和IL6均在p53^S/S自发肿瘤中高表达。且p53^S/S小鼠肌肉组织中CAFs标志物FAP、Vimentin和PDGFRα和CAFs效应因子CXCL12、CXCL1和IL6也表达升高。CAFs与小鼠肌肉组织具有相同来源,这说明p53S可能通过激活CAFs促进肿瘤的早发和转移。为了验证p53S通过激活CAFs促进肿瘤的早发和转移这一假说,制备WT、p53^-/-和p53^S/S三种基因型小鼠胚胎成纤维细胞（Mouse Embryonic Fibroblast,MEF）。qRT-PCR结果显示,相较于WT MEFs,p53^-/-和p53^S/S MEF均高表达CXCL12,且p53^S/S MEFs中CXCL12表达最高。ELISA实验进一步证实CXCL12在p53^S/S MEFs上清中高表达。此外,其他CAFs相关因子:CXCR4、CXCL1、CXCL2、IGF2、FGF7、FGF10、IL6和TGFB2在p53^S/S MEFs中表达均升高。提示:p53S可能获得促进CAFs激活的新功能。随后,通过体内外实验进一步验证p53^S/S MEFs的促进肿瘤生长和转移的CAFs特性。将肿瘤细胞PC-3分别与WT、p53^-/-和p53^S/S MEFs通过Transwell体系共培养,显示:p53^-/-和p53^S/S MEFs均可促进肿瘤细胞PC-3迁移和侵袭,而p53^S/S MEFs的促进作用更为显著。制备源于WT、p53^-/-和p53^S/S MEFs的条件培养基,CCK8检测其对PC-3增殖能力的影响,发现PC-3在p53^S/S MEFs的条件培养基中增殖水平最高。裸鼠移植瘤实验进一步证实,相较于PC-3单独注射组和PC-3+WT MEFs混合注射组,PC-3+p53^-/-MEFs混合注射组小鼠肿瘤生长略快,而PC-3+p53^S/S MEFs混合注射组小鼠肿瘤生长最快。以上数据显示,相较于p53^-/-MEFs,p53^S/S MEFs具有更强的促进肿瘤生长和转移的能力,p53S获得激活CAFs的新功能。移植瘤样本中,结合HE染色和αSMA（CAFs标记物）免疫组化的结果发现,p53^S/S MEFs+PC-3肿瘤组织中,CAFs数量更多。qRT-PCR数据显示:相较于p53^S/S MEFs或PC-3肿瘤组织,p53^S/S MEFs+PC-3肿瘤组织中CAFs标记物（αSMA、Vimentin和PDGFRA）和相关因子（CXCL12、CXCR4和TGFB2）表达升高。提示:肿瘤细胞PC-3进一步激活p53^S/S MEFs的CAFs特性综上所述,p53S通过激活CAFs,促进肿瘤的早发和转移;此外,肿瘤细胞PC-3进一步促进p53^S/S MEFs中CAFs相关因子的表达,进而形成正反馈环,构成促肿瘤的肿瘤微环境。