白藜芦醇及其类似物淬灭单线态氧的机制及抑制扩展青霉的研究

来源 :陕西师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:adder2001
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芪类化合物作为一种天然的植物衍生的次生代谢产物,在自然界中分布广泛,是一类具有相同的1,2-二苯乙烯母核的多酚化合物,其结构复杂多样,具有抗氧化、抗菌、心脏保护、抗癌等多种生物活性,其营养和保健价值而引起人们关注,尤其是随着多个芪类化合物被发现有选择性淬灭单线态氧的能力。其淬灭单线态的机制也引起人们的兴趣,因此本实验选用了具有不同官能团结构的化合物来研究其淬灭单线态氧的机制及比较不同结构的能力差异。同时探索了芪类化合物对扩展青霉的抑制作用,主要研究结果如下:1.实验室前期对白藜芦醇二聚体和白藜芦醇单体淬灭单线态氧机制研究发现,其淬灭过程中间苯二酚、邻苯二酚、碳碳双键均参与了淬灭单线态氧的反应。但是,在芪类化合物淬灭单线态氧的反应中起决定性作用的关键结构是碳碳双键、邻苯二酚还是间苯二酚还未确定。为了探究芪类化合物淬灭单线态氧的关键结构,通过UHPLC-QQQ-MS2和UHPLC-QTOF-MS2技术分析比较了白皮杉醇、白藜芦醇、二氢白藜芦醇、紫檀芪、白藜芦醇三甲醚和氧化白藜芦醇淬灭单线态氧的生理活性。结果表明,六种化合物都表现出一定的淬灭单线态的能力,也证明了间苯二酚、邻苯二酚和碳碳双键均参与了淬灭单线态氧的反应,其中邻苯二酚结构在芪类化合物淬灭单线态氧的反应中起能力最强,三种结构能力强弱依次为:邻苯二酚>碳碳双键>间苯二酚。2.进一步探究了白藜芦醇、二氢白藜芦醇、紫檀芪、白藜芦醇三甲醚、白皮杉醇和氧化白藜芦醇保护DNA免受单线态氧氧化损伤的机制和能力。利用UHPLC-QTOF-MS2和UHPLC-QQQ-MS2技术定性监测和定量分析了芪类化合物保护鸟嘌呤免受单线态氧氧化损伤过程中的化合物变化。结果显示:六种芪类化合物表现出抑制DNA的氧化损伤的活性,其反应机制是在芪类化合物存在的情况下,芪类化合物会先与单线态氧反应,从而减少单线态氧损伤鸟嘌呤,表现六种芪类化合物淬灭单线态氧的能力和保护DNA免受氧化损伤的能力,反应机制是碳碳双键、间苯二酚、邻苯二酚等结构与单线态氧反应,减少单线态氧的含量,进而保护鸟嘌呤免受单线态氧的氧化损伤。3.芪类化合物对扩展青霉的抗真菌活性研究结果表明,白藜芦醇和紫檀芪对扩展青霉的抑制效果存在明显的差异,且紫檀芪的抑制扩展青霉的活性比白藜芦醇强。在抑制扩展青霉菌丝生长方面,紫檀芪在较低浓度0.2 mM时就表现出抑制活性,且随着浓度升高,抑制效果明显增强,白藜芦醇效果较弱,低浓度时无明显抑制效果。两者都表现出一定的抑制孢子萌发的能力,紫檀芪效果更显著,能在抑制孢子萌发的同时,抑制芽管的长度。两种化合物处理后,对扩展青霉AKP,PI染色,AO染色的结果显示,两种化合物对扩展青霉的细胞壁,细胞膜都造成了一定的破坏,孢子内部的遗传物质发生不同程度的裂解,且紫檀芪的破坏效果最强。同时测定经两种化合物处理后,扩展青霉ROS含量的变化,发现ROS的含量明显增加,这和两种化合物的抑制扩展青霉的活性相对应。
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