磷脂对骨骼肌损伤修复的影响及南极磷虾油的应用研究

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磷脂是一类由极性的磷酸基团头部和非极性的脂肪酸尾部组成的两亲性脂质,具有多种功能活性。磷脂分子中脂肪酸组成的差异会显著影响其生物活性。研究发现,磷脂对骨骼肌功能的调节具有重要的影响。膳食摄入的磷脂脂肪酸组成差异会影响磷脂对骨骼肌损伤的修复作用,但是其作用效果和构效关系还需进一步研究。因此,本文对不同来源的磷脂组成进行了分析,对不同脂肪酸型磷脂对骨骼肌损伤修复作用的影响进行了探究,并对筛选出的南极磷虾油的应用进行了初步探索。具体内容如下:首先,选择了常见的蛋黄磷脂(YKPL)、大豆磷脂(SBPL)、紫苏籽磷脂(PSPL)和南极磷虾油磷脂(KOPL),利用气相色谱、液相色谱和超高效液相色谱-电喷雾电离-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-ESI-Q-TOF-MS)分析了磷脂分子的组成和结构。结果表明,YKPL、SBPL、PSPL和KOPL分别富含C18:1、C18:2、C18:3、C20:5(EPA)和C22:6(DHA)。PSPL中磷脂酰乙醇胺(PE)含量最高,占比51.50%,其余三种磷脂中磷脂酰胆碱(PC)含量最高。四种磷脂的特征磷脂分子分别为PC(C16:0/C18:1)、PC(C18:1/C18:2)、PE(C16:0/C18:3)、PC(C16:0/C20:5)。其次,建立了斑马鱼骨骼肌损伤模型,并通过双折射分析、绿色荧光蛋白标记的转基因斑马鱼、氧化应激评估等方法评价了斑马鱼骨骼肌损伤模型,利用该模型比较分析了不同脂肪酸型磷脂对骨骼肌损伤修复的效果。结果表明,磷脂可以显著修复骨骼肌损伤,减少骨骼肌中活性氧积累,其中KOPL依次优于PSPL、SBPL和YKPL。与造模组相比,KOPL实验组斑马鱼的骨骼肌相对双折射面积显著提高,从48.53%最高提高至91.97%(P<0.05),骨骼肌中相对活性氧积累量显著降低,仅为造模组的44.81%(P<0.05)。此外,对比KOPL与鱼油的作用效果,表明磷脂型EPA和DHA比甘油酯型EPA和DHA的骨骼肌损伤修复作用效果更优。最后,探索了南极磷虾油乳液的应用研究,并评价了其生物可及性,提出了关于南极磷虾油在产品开发方面存在生物可及性不高的问题的解决方案。结果表明,磷脂与乳清分离蛋白(WPI)之间存在相互作用,相比于单一乳化剂,二元乳化剂更能减小液滴平均粒径(在180~230 nm范围内)、促进乳液分散(多分散系数均低于0.26)、增强表面电位(Zeta电位均低于-30 m V)和提高南极磷虾油乳液的生物可及性,其中SBPLWPI所制备的南极磷虾油乳液的EPA和DHA生物可及性最高,分别为52.59%和53.43%。综上,本论文系统研究了四种不同脂肪酸型磷脂对骨骼肌损伤修复作用的影响,发现富含DHA和EPA的KOPL效果最佳,最后利用SBPL-WPI二元乳化剂制备了南极磷虾油乳液,显著提高了其生物可及性。本论文的实施为了解磷脂对骨骼肌损伤修复作用的构效关系提供了理论参考,为针对骨骼肌强化型功能产品的开发提供了解决方案。
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