桉树人工林感病叶片和林下土壤中Calonectria物种多样性、交配类型和致病力差异研究

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丽赤壳属(Calonectria spp.)真菌的一些物种是许多林木、农作物和观赏植物的重要病原菌。由丽赤壳属病原菌引发的桉树叶焦枯病是一种世界性病害,尤其对亚洲和南美洲的桉树人工林带来很大危害。本论文概括了丽赤壳属真菌的物种多样性、地理分布和寄主范围,阐述了丽赤壳属病原菌对桉树的危害特征和在桉树上的物种多样性,总结了针对丽赤壳属真菌测试其致病力的接种方法和孢子诱导方法,并概述了丽赤壳属真菌物种在桉树的致病力特征。桉树叶焦枯病对我国桉树产业带来巨大经济损失。在我国,丽赤壳属真菌广泛分布于桉树人工林感病组织和林下土壤,目前对桉树感病组织和桉树林下土壤中丽赤壳属真菌的物种多样性、物种遗传结构、交配类型和致病力差异特征尚不清楚。针对丽赤壳属真菌引发的桉树叶焦枯病,本研究对广西一片人工林10个尾叶桉杂交种基因型感病叶片和林下土壤进行系统的样品采集,并进行丽赤壳属真菌分离,一共分离到菌株368株。根据感病桉树的基因型种类以及叶片/土壤来源,选择其中的245株丽赤壳属菌株进行基于翻译延伸因子1-α(tef1),β-微管蛋白(tub2),钙调蛋白(cmd A)和组蛋白H3(his3)四段DNA序列的系统发生分析,并结合菌株形态学特征进行物种鉴定。这些菌株被鉴定为Calonectria hongkongensis(50.2%),Ca.pseudoreteaudii(47.4%),Ca.aconidialis(1.6%),Ca.reteaudii(0.4%)和Ca.auriculiformis(0.4%),其中Ca.hongkongensis和Ca.pseudoreteaudii是优势物种,Ca.reteaudii和Ca.auriculiformis首次在中国报道。通过对MAT1-1-1和MAT1-2-1基因进行扩增进而探究各个物种的交配类型(MAT),结果表明:Ca.pseudoreteaudii是异宗配合物种,Ca.reteaudii和Ca.auriculiformis可能是异宗配合物种,而Ca.hongkongensis和Ca.aconidialis是同宗配合物种。除Ca.pseudoreteaudii同时分离自桉树感病叶片和林下土壤,其他4个物种均只分离自桉树林下土壤。针对Ca.pseudoreteaudii,通过基于tef1,tub2,cmd A,his3,MAT1-1-1和MAT1-2-1等多段基因序列的基因型分析,结果表明来自叶片上的菌株的遗传多样性高于来自土壤中的菌株。对于本研究分离鉴定的5个丽赤壳属物种,采用菌饼和孢子悬浮液接种法接种至两个桉树基因型CEPT1876和CEPT1877上进行致病力测试,结果表明5个丽赤壳属物种对两个桉树基因型均具有致病性。本研究证实引发广西桉树人工林10个桉树基因型叶焦枯病的致病菌为Ca.pseudoreteaudii,而分离自桉树林下土壤的Ca.hongkongensis,Ca.auriculiformis,Ca.reteaudii和Ca.aconidialis为我国桉树潜在的病原菌。针对同时分离于桉树感病叶片和林下土壤的物种Ca.pseudoreteaudii,分离于林下土壤和感病叶片的Ca.pseudoreteaudii菌株对供试的两个桉树基因型均具有强致病性,整体上分离于感病叶片的菌株致病力比分离于林下土壤菌株的致病力强,但相互之间的差异并不十分明显。两个桉树基因型对丽赤壳属真菌的抗病性存在差异,对于大多数菌株,桉树基因型CEPT1876对丽赤壳属真菌的抗病性高于桉树基因型CEPT1877。本研究进一步证实Ca.pseudoreteaudii是引发我国桉树叶焦枯病的重要病原菌,并强化了对同一桉树人工林感病叶片和林下土壤中丽赤壳属真菌物种的遗传多样性、形态特征、寄主多样性、交配类型和致病性的认知。
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