目的:正常妊娠中,绒毛和蛻膜的增殖和凋亡是相对平衡的,异常的凋亡会导致病理性妊娠和流产的发生。p53作为一种重要的凋亡通路,近年来在复发性流产中被广泛研究。细胞骨架调控蛋白stathmin-1(STMN1)是一个在进化上很保守的微管结合蛋白,研究发现在乳腺癌,胃癌和前列腺癌中STMN1参与调控AKT信号通路,β-catenin信号通路等,促进肿瘤细胞的迁移和增殖。相比较而言,在母-胎界面滋养层细胞中STMN1的生物学功能仍知之甚少。本课题通过收集复发性流产样本和建立体外滋养层细胞模型来探索STMN1在母胎界面的差异表达及其重要性,并且进一步研究影响STMN1表达差异的生物学机制和相互作用,从而为更好的阐明其在母胎界面的重要作用提供依据。方法:收集复发性流产和正常流产的绒毛样本,使用免疫组织化学和蛋白印迹实验(Western blot)检测人母胎界面STMN1和p53的变化。用p53基因的激活剂阿霉素(doxorubicin)作用于HTR8-S/Vneo滋养层细胞系体外模拟复发性流产模型,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白印迹实验(Western blot)、细胞免疫荧光技术检测STMN1和Tristetraprolin(TTP)在mRNA和蛋白水平的变化。构建携带TTP基因双荧光素酶报告基因质粒,将其与突变序列的STMN1转录因子表达质粒共转染HTR8细胞系,通过检测STMN的表达情况,探索STMN1与TTP的关系。收集阿霉素处理过的HTR8细胞系细胞裂解液,使用核质分离试剂盒进行分离,测定TTP和STMN的细胞内定位及变化。构建TTP的过表达质粒和siRNA,使用基因的敲低与过表达技术通过Western blot验证二者的相互关系。结果:收集的人绒毛组织的免疫组织化学和Western blot实验结果显示STMN1表达在绒毛的合体滋养层细胞且复发性流产患者的表达降低,而p53在复发性流产患者中表达增高。体外细胞实验结果显示,当使用阿霉素使磷酸化的p53增多后,STMN1表达降低,TTP表达增高,产生差异的时间是24h,最适浓度是0.5-1.5 nmol/ml。细胞核质分离实验发现TTP主要表达在胞核内,且使用阿霉素以后出现从胞核内TTP表达升高的现象。Luciferase报告实验结果表明,突变TTP的任意一个结合位点以后,STMN1的表达都升高,突变两个以后效果更显著,并且有统计学意义,而过表达TTP以后,实验显示STMN1的表达降低。过表达TTP后,STMN1的表达量降低,敲低TTP后,STMN1的表达升高。结论:在复发性流产患者中p53凋亡通路表达增多,可能会引起TTP表达增多从而导致STMN1表达不足,滋养层细胞侵袭不足,影响胚胎着床和胎盘的植入,破坏人类滋养层功能,从而引起妊娠失败。