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目的: 通过建立以氟比洛芬为底物的体外代谢体系，采用高效液相色谱-紫外检测方法，研究健康正常人群细胞色素P4502C9基因多态性对氟比洛芬体外代谢的影响，考察CYP2C9野生型以及其他变异型的重组酶对氟比洛芬体外代谢的影响差异，为临床合理使用氟比洛芬提供了实验依据和理论指导。 方法: 1、氟比洛芬及其代谢物4-羟基氟比洛芬的测定采用ZORBAX SB-C18色谱柱分离;流动相为乙腈-水-0.1％TFA梯度洗脱;流速为1mL/min，柱温40℃;检测波长280nm。 2、建立氟比洛芬重组酶的孵育体系，300μ1体系中包含5～160μmol/L的氟比洛芬和各变异型的重组酶，37℃水浴中孵育12分钟后，终止反应。样品经处理后，提取氟比洛芬及其代谢产物，经高效液相检测，得出代谢产物(4-羟基氟比洛芬)的生成量。通过GraphPad5.0作图，求出CYP2C9野生型以及其他变异型重组酶的酶动力学参数(Km和Vmax)，通过计算获得其清除率。得出羟基氟比洛芬的相对清除率后，将其与氯沙坦代谢物的相对清除率进行比较，得出相同之处和不同之处。 结果: 1、实验表明，氟比洛芬在2.5～320μmol/L浓度范围内线性关系良好(R2=0.999)，4-羟基氟比洛芬在0.1～50μmol/L浓度范围内线性关系良好(R2=0.993)，定量下限氟比洛芬为2.5μmol/L，4-羟基氟比洛芬为0.1μmol/L。氟比洛芬和4-羟基氟比洛芬的日内、日间精密度的RSD均小于15％;提取回收率均大于65％，稳定性的RSD均小于10％。 2、相对于CYP2C9野生型(CYP2C9*1)重组酶，各变异型重组酶的代谢活性均发生了改变，Km和Vmax都有不同程度的变化。除CYP2C9*53和CYP2C9*56，其他各变异型的清除率明显低于野生型的清除率。其中，以下这些变异型活性介于CYP2C9*2与野生型之间:CYP2C9*34，*37，*38，*44，*46，*47，*48，*50，*51和*54; CYP2C9*11,*14,*27,*29,*36,*40,*41,*49和*55介于CYP2C9*2和CYP2C9*3之间，其余变异型的活性更弱。另外，*33和*43由于活性太弱，生成的代谢物浓度太低，因而无法检测其代谢产物。与氯沙坦代谢物比较，个别型差异很大，比如*36型。 结论: 1、本实验建立的检测体外代谢的氟比洛芬及其代谢物浓度的高效液相色谱法，操作简便，分离完全，结果可靠，可用于药物代谢动力学分析。 2、体外结果表明，被测的35个CYP2C9变异型，除CYP2C9*53和CYP2C9*56活性升高外，其余均引起活性下降，提示携带这些变异型的个体临床用药时，应调整患者的给药剂量。