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研究目的:TEAD4（transcriptional enhancer associate domain family member 4）是TEAD转录因子蛋白家族成员之一,TEAD4分子的转录激活结构域能与YAP（Hippo信号通路中主要的共激活因子）相结合,形成转录调控复合体,调控下游肿瘤生长侵袭相关基因的转录。目前已发现,TEAD4与胃癌、肺腺癌、口腔鳞癌等多种恶性肿瘤的不良生物学行为相关,且有研究表明,人乳头瘤病毒16型（human papilloma virus,HPV16）诱导的角质细胞中存在TEAD4的高表达,但关于TEAD4与子宫颈鳞状细胞癌（cervical squamous cell carcinoma,CSCC）的关系目前尚未见报道。本课题旨在探讨TEAD4与CSCC增殖和侵袭的关系,并对其调节通路进行初步研究,为CSCC的临床诊疗以及开发新的分子靶标提供科学依据。方法:1.生物信息学技术分析:应用TCGA数据库分析TEAD4和MMP9在宫颈癌组织和正常组织的表达差异,利用在线数据库GEPIA,根据pearson相关性分析TEAD4与MMP9基因的相关性,利用OncoLnc在线数据库,采用Kaplan-Meier分析TEAD4的表达对宫颈癌患者生存率的影响。2.临床病理标本分析:收集2011年至2019年南昌大学抚州医学院附属医院确诊的CSCC肿瘤病理标本50例作为研究对象,慢性宫颈炎患者宫颈病理标本20例作为对照组;免疫组织化学Max VisionTM法检测患者石蜡标本肿瘤组织和对照组宫颈组织中TEAD4、MMP9的表达情况,分析TEAD4在CSCC和慢性宫颈炎组织中的表达差异,CSCC组织中TEAD4和MMP9的表达与临床病理参数之间的关系,以及TEAD4和MMP9的相关性。3.细胞实验:子宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞分为control组、vector组、pCMV3-TEAD4转染组,应用脂质体Sinofection分别进行对照质粒、pCMV3-TEAD4质粒转染,Western blotting检测各组细胞TEAD4、MMP9和磷酸化ERK蛋白表达水平;CCK8法检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞侵袭。4.机制研究:ERK抑制剂U0126预处理SiHa细胞后,进行TEAD4基因瞬时转染,Western blotting检测细胞中ERK、磷酸化ERK和MMP9表达水平的变化。结果:1.通过TCGA数据库分析发现TEAD4和MMP9在宫颈癌组织中均呈高表达（P＜0.05）,利用在线数据库GEPIA,根据pearson相关性分析发现TEAD4与MMP9基因呈正相关（R=0.17,P＜0.01）;利用OncoLnc在线数据库,采用Kaplan-Meier曲线分析TEAD4的表达对宫颈癌患者总体生存率的影响,结果发现低表达TEAD4的患者的生存率高,但差异不显著（P＞0.05）。2.免疫组化方法检测组织标本中蛋白表达,并通过图像采集软件选择3个代表性视野输入光密度分析软件image pro-plus 6.0进行光密度分析,结果显示,CSCC组织中TEAD4平均表达水平（0.186±0.0355）显著高于对照组宫颈上皮组织（0.0494±0.0105,P＜0.001）。CSCC组织中MMP9的平均表达水平（0.180±0.0310）显著高于对照组宫颈上皮组织（0.0608±0.0211,P＜0.001）。相关性分析结果显示,在CSCC组织中TEAD4的表达与MMP9的表达呈正相关关系（r=0.394,P＜0.01）。进一步临床病理参数分析显示,TEAD4的表达与CSCC的淋巴结转移（P＜0.05）、脉管浸润（P＜0.05）、宫旁浸润（P＜0.05）及分期（P＜0.05）有关,与肿瘤的患者年龄（P＞0.05）、肿瘤直径（P＞0.05）和分化程度（P＞0.05）无关。MMP9的表达与CSCC的淋巴结转移（P＜0.05）、宫旁浸润（P＜0.05）有关,与CSCC的患者年龄（P＞0.05）、肿瘤直径（P＞0.05）、分化程度（P＞0.05）、脉管浸润（P＞0.05）和分期（P＞0.05）无关。3.TEAD4基因转染SiHa细胞后,Western blotting检测结果显示,TEAD4的蛋白表达水平显著高于control组和vector组（P＜0.01）;CCK-8细胞增殖实验显示,TEAD4基因转染后细胞的增殖能力显著升高（P＜0.01）。Transwell小室实验显示,TEAD4基因转染组癌细胞的侵袭能力显著高于control组和vector组（P＜0.05）。4.Western blotting检测TEAD4基因转染组SiHa细胞中MMP9蛋白和磷酸化ERK表达水平,结果显示该组癌细胞中MMP9和磷酸化ERK的表达水平显著高于对照组（P＜0.05）。5.ERK抑制剂U0126预处理SiHa细胞后再进行pCMV3-TEAD4质粒转染,此联合处理组的细胞中磷酸化ERK、MMP9的表达水平显著下降（P＜0.01）。结论:1.TEAD4高表达于CSCC,且与CSCC淋巴结转移、脉管浸润、宫旁浸润、分期有关。2.高表达TEAD4能促进CSCC的增殖和侵袭能力,其分子机制可能与TEAD4活化ERK信号从而上调MMP9的表达有关。