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原发性肝癌是世界第三肿瘤致死性疾病,也是中国的难治性肿瘤之一,其90%以上是原发性肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)。在原发性肝癌的发生,发展和治疗过程中均与免疫有关,可能与免疫有关的检测物是一个有效的肿瘤标志物；原发性肝癌的化疗有效率不尽人意,细胞自噬与肿瘤的发生、发展、治疗密切相关,亦在近年肿瘤研究中备受关注。针对HCC上述2个关键问题,开展了原发性肝癌“外周血MDSCs的研究”和“吉西他滨诱导肝细胞癌HepG2细胞自噬的研究”。其特色是外周血的检测物具有无创,易多次取材,可动态观察,研究的MDSCs与肿瘤免疫逃逸有关；吉西他滨对HCC的的自噬机制研究鲜见报道。第一部分原发性肝癌外周血MDSCs的研究目的：在已有的研究中发现髓系衍生抑制细胞(MDSCs)在荷瘤小鼠和癌症患者中比例明显升高。本研究对肝细胞癌(HCC)患者外周血中MDSCs(标记为Lin-/low WCD33+HLA-DR-)的行为进行探索,进一步明确其临床意义,同时也对MDSCs的免疫调控通路进行相关研究。方法：采集外周血,肝细胞肝癌组(n=63)和健康志愿者组(n=56),测定MDSCs在外周血单核细胞中所占比例。同时测定了外周血中IFN-γ、 VEGF、 COX-2、MMP-13、NOS-2、ARG-1的表达。MDSCs对T细胞的抑制作用则通过CFSE进行检测。结果：未经治疗的肝细胞肝癌患者MDSCs的比例与肿瘤分期相关,分期越晚MDSCs所占比例越高(P=0.0004)。脾肿大患者外周血中MDSCs含量更高。其他相关的临床特征,如肝硬化、肝炎病毒感染等均未明显影响MDSCs的比例。外周血中COX-2, MMP-13和VEGF表达与MDSCs的变化相关。结论：研究表明肝细胞肝癌患者外周血中标记为Lin-/low CD33+HLA-DR-的MDSCs明显升高。并且MMP-13和COX-2表达可能与肝细胞肝癌患者MDSCs的行为有关,影响肝细胞肝癌的发生发展。第二部分吉西他滨诱导肝细胞癌HepG2细胞自噬的研究目的：研究吉西他滨作用肝细胞癌HepG2细胞诱导细胞自噬及分子机制。方法：通过检测HepG2细胞在吉西他滨作用后微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)的变化,透射电镜(TEM)检测自噬泡,western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-XL水平及加用氯喹抑制自噬和si-BECN1干扰观察吉西他滨对HepG2细胞的细胞毒性。结果：吉西他滨有效地抑制肝细胞癌HepG2细胞的增殖,呈时间和浓度依赖性,吉西他滨亦可诱导肝细胞癌HepG2细胞自噬水平明显增强,可使抗凋亡蛋白Bcl-XL水平升高,抑制吉西他滨诱导的自噬可以促进吉西他滨对肝细胞癌HepG2细胞的毒性。结论：吉西他滨作用于人肝细胞癌HepG2细胞抑制其增殖时,亦可诱导HepG2细胞的自噬水平升高,抑制自噬可以增强吉西他滨对肝细胞癌HepG2细胞的增殖抑制和凋亡诱导能力。临床上吉西他滨治疗原发性肝癌时是否加用自噬抑制剂能增加疗效需进一步验证。