金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,简称金葡菌)是引起化脓性感染的常见人兽共患致病菌，能引发从皮肤创口到心内膜炎，脑膜炎，关节炎，骨髓炎等在内的大部分感染，严重威胁着人类的健康和财产安全。二十世纪中期，青霉素等抗生素的发现为治疗细菌感染，延长人类寿命做出了重要的贡献。然而由于抗生素的滥用致使细菌耐药严重，尤其是耐甲氧西林金葡菌(methicillin-resistantStaphylococcus aureus, MRSA)，自1961年发现以来，仅通过十年时间就迅速蔓延至全球。MRSA是世界范围内引发医院交叉感染的主要病原菌，其感染发病率还在逐年上升。而且MRSA具有多药耐药的特性，对目前大部分的临床抗菌药物耐受，甚至包括一度被视为对MRSA治疗效果最好的万古霉素。耐药性的发展使得可供选择的药物越来越少，因此治疗细菌感染的当务之急是寻找新的抗菌靶点及相应抑制剂，有效并安全的解决细菌的耐药性问题。抗毒力策略就是在这一压力下提出的治疗细菌感染的新途径。该策略有别于传统的抗菌途径，并不直接杀灭细菌，而是通过抑制毒力因子的表达或激活，降低细菌的致病性。如此便降低了细菌产生耐药性的可能。Sortase是介导革兰氏阳性菌黏附因子锚定在细胞壁上的关键酶，与细菌的黏附，定植密切相关，但其存在与否并不影响细菌的生长，因此被视为抗毒力策略的新靶点，对其抑制剂的筛选也成为了抗菌研究中的热点。中药是我国得天独厚的天然药物资源，长久以来在各种疾病的治疗中发挥着重要的作用。本研究通过对金葡菌SrtA基因的克隆、表达和纯化，采用荧光共振能量转移法在清热解毒类中药的有效成分中进行SrtA抑制剂的筛选，并发现了5种对金葡菌SrtA具有抑制作用的中药单体。其中芦丁(Rutin)的抑制活性较好，且未见文献报导。芦丁是一种来源广泛的天然黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗血小板凝集等多种药理活性。在荧光共振能量转移试验中芦丁表现出较好的SrtA抑制活性。因此，本研究进一步通过凝集试验和蛋白结合试验对芦丁的抑制活性进行菌体内评价。此外，还通过蛋白免疫印迹观察芦丁是否在抑制SrtA活性的同时影响SrtA的表达。结果表明芦丁对金葡菌SrtA的表达没有抑制作用，但可以通过抑制SrtA的活性显著抑制金葡菌的凝集反应。蛋白结合试验结果表明，不同浓度的芦丁对金葡菌的黏附具有抑制作用，呈剂量依赖关系。金葡菌在64μg/mL芦丁作用下，对纤维蛋白原和纤连蛋白的黏附率分别下降了72.03%和65%，进一步验证了芦丁的抑制活性。这一结果说明芦丁有潜力成为以SrtA为靶点的抗菌治疗的先导化合物。综上所述，芦丁对SrtA酶抑制活性的研究和评价为以sortase为靶点的抗菌药物的研发提供了理论依据。