流感病毒是季节性流感的常见病因,其宿主广泛,传播迅速。其中甲型流感病毒极易变异,是全球健康的潜在威胁。疫苗接种可有效防控流感,而流感新疫苗的研制存在滞后性,难以用于预防新毒株导致的疫情。流感病毒神经氨酸酶抑制剂作为被批准的抗流感药物,多年来被用于预防和治疗流感病毒的感染,随着其耐药性的增加,疗效降低。目前抗病毒药物的选择十分有限,迫切需要具有不同作用方式的新型抗病毒药物。天然产物分布广泛,结构繁多,其中五环三萜类化合物,凭借新颖的作用机制,受到广泛关注。齐墩果酸是一种分布在多种植物中的五环三萜类化合物,具有广泛的生物活性以及药理作用,如抗肝炎、抗癌和抗菌等活性。本文旨在评价一系列新型齐墩果酸衍生物,研究其构效关系和作用机制,为新型抗病毒药物的研究提供实验依据。本论文利用流感病毒A549细胞感染模型,采用间接免疫荧光实验测定11个新型齐墩果酸衍生物的抗流感病毒活性,获得衍生物抗病毒活性的EC50值,利用MTT法测定衍生物对细胞活力的影响,获得其细胞毒性CC50值,计算出选择指数SI值,其中化合物OA-10显示较高的抗病毒活性(EC50=14μM)和极低的细胞毒性(CC50＞640μM),选择指数最高（SI＞45）,因此选择OA-10开展深入的抗病毒活性及作用机制研究。通过间接免疫荧光、终点稀释法、q RT-PCR,测定OA-10在A549细胞上作用48h的抗病毒活性以及在不同作用时间24 h、48 h和72 h的病毒抑制动力学活性,通过间接免疫荧光实验考察OA-10对不同流感病毒亚型的抗病毒活性,通过终点稀释法、q RT-PCR研究OA-10在不同作用模式和单周期内不同时间段添加的抑制作用。通过血凝抑制、表面等离子共振分析、溶血抑制,分子对接等试验探讨OA-10的抗流感病毒作用机制。结果表明,OA-10在A549细胞上对四种不同亚型的流感病毒（H1N1,H5N1,H9N2和H3N2）均表现出显著的抗病毒活性,而细胞毒性极低。OA-10在20～40μM作用48 h时,子代病毒产量,流感病毒核蛋白（NP）的合成和核蛋白NP m RNA的表达均显著降低,呈剂量依赖性,且在24～72 h能持续抑制病毒复制。在病毒感染后添加OA-10的抑制作用最佳,且在感染后0～2 h和2～4 h时间段添加OA-10抑制作用更明显,OA-10在流感病毒感染的早期阶段发挥作用。OA-10以剂量依赖的方式抑制酸性条件下流感病毒血凝素蛋白（HA）诱导的溶血,IC50为26μM,并且在浓度高于40μM时,对HA与鸡红细胞的吸附有较弱的抑制作用。表面等离子体共振分析表明OA-10与HA的相互作用呈剂量依赖性,平衡解离常数（KD）为2.98×10-12 M。计算机辅助分子对接分析表明OA-10可能通过氢键和疏水相互作用结合到HA茎干区域中HA1-HA2界面处的高度保守的疏水沟。本论文发现OA-10对多种亚型的流感病毒有良好的体外抗病毒活性。OA-10抑制作用主要发生在病毒感染的早期阶段,通过阻断病毒与晚期内涵体膜融合必需的HA2亚基的构象改变从而抑制病毒的复制,研究结果为新型抗流感病毒进入抑制剂的开发提供了实验依据。