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目的:本研究设计一种具有靶向作用且可以双载化疗药物替莫唑胺及小干扰RNA(si RNA)si PLK1的纳米载体,观察其是否能增加脑胶质瘤对化疗药物替莫唑胺(TMZ)的敏感性,为临床治疗脑胶质瘤提供新的视角。方法:1.应用悬浮滴定、透析及静电吸附等方法将相关材料组装成纳米载体A2PEC及纳米聚合物TMZ-A2PEC/si PLK1;2.纳米聚合物组装后,运用马尔文粒度仪(Nano-ZS粒度测定仪)检测其物理特征,用透射电子显微镜检测纳米载体A2PEC及纳米聚合物TMZ-A2PEC/si PLK1是否构建成功;3.运用琼脂糖凝胶电泳技术检测纳米载体A2PEC对si PLK1药物的包载率;4.运用酶标仪检测纳米载体A2PEC对化疗药物替莫唑胺的包载率及载药量;5.运用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测纳米载体A2PEC对U87R细胞的靶向作用及U87R细胞对纳米聚合物的内吞效果;6.运用MTT实验检测TMZ-A2PEC/si PLK1对U87R细胞和LN-229细胞的毒性;7.运用细胞周期实验检测TMZ-A2PEC/si PLK1对U87R细胞和LN-229细胞的细胞周期的影响;8.运用流式细胞仪检测TMZ-A2PEC/si PLK1对U87R细胞凋亡的影响;9.运用q RT-PCR、Western blot技术检测TMZ-A2PEC/si PLK1对U87R细胞目的基因及蛋白表达的调控作用;10.对U87原位小鼠脑胶质瘤荧光强度的变化运用活体成像检测,并根据荧光强度变化绘制统计图,同时绘制小鼠生存曲线及体重变化曲线;11.运用HE染色检测TMZ-A2PEC/si PLK1对模型小鼠主要脏器的毒性效应。结果:1.对纳米聚合物的理化性质的检测结果显示其形态均匀一致,粒径大小合适,且其电位大小符合实验要求;2.琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,纳米载体A2PEC在N/P为1时可以有效负载si RNA药物(si PLK1);3.酶标仪检测结果显示,纳米载体A2PEC可以有效负载TMZ;4.流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测结果显示,纳米载体A2PEC对U87R细胞具有较好的靶向作用,且U87R细胞能有效地内吞纳米聚合物;5.细胞周期实验检测结果显示,TMZ-A2PEC/si PLK1能有效地将U87R细胞和LN-229细胞的细胞周期阻滞在G2/M期;6.流式细胞仪及MTT实验检测结果显示,TMZ-A2PEC/si PLK1具有促进U87R细胞凋亡作用以及抑制U87R细胞和LN-229细胞增殖的作用(P<0.001);7.q RT-PCR、Western blot技术检测结果显示,TMZ-A2PEC/si PLK1对U87R细胞目的基因及蛋白的表达具有显著下调作用(P<0.001);8.活体成像及HE染色检测结果显示,TMZ-A2PEC/si PLK1能够有效抑制U87原位小鼠脑胶质瘤的增殖(P<0.01),并能够显著延长实验小鼠的生存期(P<0.001),且未对主要脏器组织造成明显损害。结论:本研究成功研制了纳米聚合物TMZ-A2PEC/si PLK1,体内外实验结果均表明,TMZ-A2PEC/si PLK1能够对胶质瘤细胞发挥靶向作用,对胶质瘤细胞的增长产生抑制效应,增强了脑胶质瘤对化疗药物TMZ的敏感性,动物实验中小鼠的生存期增加,且对主要脏器无毒副作用,可以为胶质瘤的治疗提供一种新的解决方案。