【摘 要】
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目的:以tau蛋白过度磷酸化为反映AD (Alzheimer’s Disease)发生发展的关键指标,初步探明实验性AD诱导产生过程中的PTEN表达状况及其与tau蛋白过度磷酸化的关系,以深化理解AD
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目的:以tau蛋白过度磷酸化为反映AD (Alzheimer’s Disease)发生发展的关键指标,初步探明实验性AD诱导产生过程中的PTEN表达状况及其与tau蛋白过度磷酸化的关系,以深化理解AD的发病机制;探讨褪黑素(melatonin, MLT)抗AD样细胞效应及其与tau蛋白过度磷酸化及PTEN表达的关系,为MLT及其同系物的临床应用提供理论基础。方法:①采用冈田酸(Okadaic acid,OA)诱导SH-SY5Y细胞,以tau蛋白过度磷酸化和细胞活性的变化为观察指标,建立用于AD研究的细胞模型。②MTT法检测细胞活性。③Western blot法测定SH-SY5Y细胞Ser396位点磷酸化tau蛋白水平和PTEN蛋白水平。④免疫细胞化学法观测SH-SY5Y细胞内tau蛋白样免疫阳性反应物。结果:①OA孵育SH-SY5Y细胞可显著降低细胞活性,作用随着OA浓度的增高和作用时间的延长而增强;40 nmol/L OA作用SH-SY5Y细胞不同时间,可见细胞中Ser396位点磷酸化tau蛋白水平于作用后3h开始升高,6h和12h进一步升高,24h达高峰,随后开始下降,48h的水平仍高于基础值,提示OA可诱导SH-SY5Y细胞活性下降和tau蛋白过度磷酸化。②40 nmol/L OA孵育SH-SY5Y细胞,同时观测细胞中Ser396位点磷酸化tau蛋白水平和PTEN蛋白水平随OA作用时间的变化,可见Ser396位点磷酸化tau蛋白水平变化同上,而PTEN蛋白水平于OA作用后6h、12h高于基础水平,24h、48h
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