目的:尼妥珠单抗是抗EGFR的人源化IgG1型单克隆抗体，对多种上皮来源肿瘤均具有治疗作用。本课题将尼妥珠单抗与放疗联合作用于非小细胞肺癌A549细胞系，研究其对肺癌细胞的放射增敏作用及分子机制。　　材料与方法:体外培养人肺腺癌A549细胞系，部分实验同时对乳腺癌细胞MCF-7进行以作为参照。首先，MTT法检测尼妥珠单抗对A549细胞的抑制作用，通过克隆形成实验测定尼妥珠单抗和放射联合作用于肺癌细胞系在不同剂量点的细胞存活率，并根据数学模型拟合细胞存活曲线，与单纯放射组比较，求出放射增敏比(SER)。其次，流式细胞术检测尼妥珠单抗联合2Gy、8GyX线照射产生的细胞凋亡和细胞周期变化。然后，经免疫荧光学检测检测γ-H2AX焦点数量，明确尼妥珠单抗与放射联合和单纯放射后DNA双链断裂数量的差异。最后，Western-blot检测尼妥珠单抗与放射联合作用后两种细胞系EGFR磷酸化水平的差异，再检测A549细胞接受辐射后细胞周期调控因子p27及DNA双链损伤修复相关蛋白AKT、DNA-PKcs、ATM及其磷酸化形式在不同时间及不同剂量点的表达情况，与单纯放射组比较表达的差异。　　结果:尼妥珠单抗对A549细胞的抑制作用较弱，在作用24小时后，700nM的药物浓度对A549细胞的抑制率为10％。克隆形成实验显示尼妥珠单抗显著增加了A549细胞的放射敏感性，放射增敏比(SER)为1.36。尼妥珠单抗可增加A549细胞及MCF-7细胞的凋亡率，且与放疗联合后进一步促进细胞凋亡。尼妥珠单抗使细胞周期阻滞于G1/S期，而辐射后细胞周期阻滞于G2/M期，二者联合作用后S期比例较单纯放射组细胞显著减少。尼妥珠单抗增加了各剂量点放射后γ-H2AX的焦点数量，说明DNA双链断裂数量显著增多，双链断裂修复受到抑制。尼妥珠单抗与放射联合作用后，辐射诱导的EGFR磷酸化被抑制，AKT、DNA-PKcs、ATM在放射后各时间点以及不同剂量点表达均无差异，但AKT在Thr308位点磷酸化和DNA-PKcs在Thr2609位点磷酸化则受到显著抑制。p27蛋白在放射后各时间点以及不同剂量点照射后表达水平显著下降，而尼妥珠单抗作用后p27表达明显增加，再行照射后仍有较高表达。　　结论:尼妥珠单抗对体外培养的非小细胞肺癌细胞系具有放射增敏作用，其生物机制在于尼妥珠单抗通过对EGFR功能的抑制，抑制了其下游信号通路PI3K-AKT的激活，使AKT不能激活DNA-PKcs，其修复辐射诱导的DNA双链断裂功能受到抑制，使细胞凋亡增加，辐射的细胞杀伤作用增强。尼妥珠单抗联合辐射使细胞周期分布发生改变，对放射较为抗拒的S期比例减少，初步证实与尼妥珠单抗导致p27表达水平增高有关。