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目的:
内膜癌为雌激素依赖性疾病,高雌激素环境是是导致疾病发生与加重的主要因素之一,而绝经后女性随着绝经年限的增加,雌孕激素水平是否与内膜癌的发生相关,相关报道较少,目前尚无具有临床指导的报道。本文将利用酶联免疫分析法检测绝经后子宫内膜癌患者血清雌孕激素水平及其与雌孕激素受体表达的关系。
实验材料与方法:
于2007年4月至2008年6月在中国医科大学附属盛京医院妇产科住院绝经后手术患者70例,其中对照组:经病理确诊子宫内膜癌患者40例,其中绝经时间≤10年患者20例,绝经时间>10年患者20例;实验组:因子宫脱垂行子宫切除患者30例,其中绝经时间≤10年患者10例,绝经时间>10年患者20例。实验组患者平均年龄:60.33±6.47岁;对照组患者平均年龄:65.57±8.39岁;两组比较,P>0.05,具有可比性。入组患者均经医院伦理委员会批准,并在每次采集标本前均由患者签署知情同意书。空腹抽取静脉血2ml,700转/分离心,留取血清,2-8℃保存待用。两组入选患者术前三个月内均未使用性激素类药物。术后均经病理证实排除其他雌激素依赖性疾病存在。
一、酶联免疫分析利用酶联免疫分析法检测雌孕激素水平,用美国贝克曼DX:800免疫分析仪,采用化学发光法进行检测。分别应用雌孕激素标准品和指控品制定标准曲线和室内质控,质控通过后即可检测标本。应对每一个标本设置一个样品架的位置,输入样品信息和需检测试名称后,按下run键开始检测,系统自动计算检测结果。雌孕激素水平检测结果以pg/ml表示,每组结果以x±spg/ml进行比较。
二、免疫组织化学法H&E染色:实验组癌组织石蜡切片常规脱蜡至水,苏木素染色5分钟,流水冲洗5分钟,1%盐酸酒精分化,自来水返蓝30分钟,依红染色4分钟,蒸馏水洗5次,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。
采用免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(S-P)法,以已知子宫内膜组织阳性切片作为阳性对照,以0.01M磷酸盐缓冲溶液(PBS)代替一抗作为阴性对照。按说明书操作。显微镜下观察。结果判定:ER,PR以细胞核呈黄褐色为阳性表达。随机取5个高倍视野,ER,PR无着色或阳性细胞<25%为阴性;阳性细胞数≥25%为阳性。
实验结果:
实验组与对照组比较,雌孕激素水平无明显差异,雌激素水平:(t=0.844,P=0.779>0.05);孕激素水平:(t=0.044,P=0.563>0.05)。而绝经年限≤10年组,雌激素水平:(t=0.509,P=0.010<0.05);孕激素水平:(t=0.799,P=0.160>0.05)及>10年组雌激素水平:(t=1.655,P=0.002<0.05);孕激素水平:(t=0,871,P=0.534>0.05)。
子宫内膜癌患者雌孕激素水平与雌孕激素受体表达关系:实验组患者术后病理免疫组化检查雌孕激素受体(ER/PR)表达,阳性与阴性组雌孕激素水平无统计学差异.
结论:
子宫内膜腺癌为雌激素依赖性疾病,绝经后内膜腺癌患者血清雌孕激素水平无异常增高,但不同绝经年限患者比较,内膜癌患者雌激素水平相对增高,有可能相对增高的雌激素水平成为绝经后妇女内膜癌高危因素。
内膜癌组织雌孕激素受体表达情况与雌孕激素水平无相关性。