【摘 要】
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目的采用自发性2型糖尿病小鼠(KKAy小鼠)为研究对象,观察不同配伍比例的天花粉黄精药对水提物对糖脂代谢的影响,并基于PI3K/AKT/FoxO1信号通路,探讨天花粉黄精药对改善胰岛素抵抗的作用机制,为临床应用提供依据。方法本试验以自发性2型糖尿病KKAy小鼠为动物模型,采用随机对照试验方法,测得30例非同日随机血糖≥11.1 mmol/L的小鼠纳入实验。按体重、血糖区组随机法分为5组:模型组、二
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目的采用自发性2型糖尿病小鼠(KKAy小鼠)为研究对象,观察不同配伍比例的天花粉黄精药对水提物对糖脂代谢的影响,并基于PI3K/AKT/FoxO1信号通路,探讨天花粉黄精药对改善胰岛素抵抗的作用机制,为临床应用提供依据。方法本试验以自发性2型糖尿病KKAy小鼠为动物模型,采用随机对照试验方法,测得30例非同日随机血糖≥11.1 mmol/L的小鼠纳入实验。按体重、血糖区组随机法分为5组:模型组、二甲双胍组,天花粉、黄精药对配方1组(天花粉30 g、黄精30 g)、配方2组(天花粉15 g、黄精45 g)、配方3组(天花粉10 g、黄精50 g),每组各6只。同时将6只同周龄C57BL/6J小鼠设为正常对照组。连续给药8周,第7周进行0GTT试验。实验中观察小鼠一般状况、空腹血糖、体重、进食量。8周后取材,检测小鼠血清糖脂代谢相关指标;对肝脏组织行HE、PAS染色,观察肝脏形态、糖原含量;应用蛋白质免疫印迹法测定肝组织PI3K/AKT/FoxO1信号传导途径相关蛋白的表达。结果1.一般情况监测:正常组小鼠状态良好,反应敏捷、行为活跃,进食量正常;KKAy小鼠表现出明显多饮、多食、多尿的特点。给药8周后,各给药组小鼠平均进食量较模型组显著减少(P<0.05),其中以二甲双胍、天花粉黄精药对配方1、配方2组效果效果最为明显(P<0.01)。2.血清检测:正常组小鼠糖脂代谢正常,模型组出现明显糖脂代谢异常:FBG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL显著上升(P<0.01);与模型组比较,二甲双胍组、天花粉黄精药对各配伍组均可显著降低KKAy小鼠FBG、TC、LDL(P<0.01),配方2组可显著降低TG(P<0.01);各给药组FINS有下降趋势,但与模型组相比均无统计学差异,HOMA-IR显著下降(P<0.01)。3.肝组织形态学观察:HE染色显示天花粉、黄精药对各治疗组可明显改善KKAy小鼠肝脏脂肪变性,改善肝细胞形态和结构;糖原(PAS)染色显示出天花粉、黄精药对可增加KKAy小鼠肝糖原含量。4.Western Blot:与正常组相比较,模型组小鼠肝脏的PI3Kp85、p-AKT、p-FoxO1蛋白表达均显著降低,FoxO1蛋白表达明显升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,天花粉、黄精药对组肝脏PI3K、p-AKT、p-FoxO1蛋白表达显著增强(P<0.05或P<0.01),FoxO1蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论1.天花粉、黄精药对能够显著改善KKAy小鼠的糖脂代谢紊乱以及胰岛素抵抗,其中以天花粉、黄精为1:3配伍比例(天花粉15g、黄精45g)即配方2效果最好。2.天花粉、黄精药对能够显著改善KKAy小鼠肝脏脂肪变性,改善肝细胞形态和结构,并促进肝糖原合成。3.天花粉、黄精药对对PI3K/AKT/FoxO1信号通路有一定调节作用,可通过增强PI3K、p-AKT、p-FoxO1蛋白表达,抑制FoxO1蛋白表达,改善胰岛素抵抗。
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