Nudel和dynein在有丝分裂纺锤体组装中的功能

来源 :中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:djjsl
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有丝分裂纺锤体存在于目前已知的所有真核细胞中,主要负责细胞分裂时已复制染色体的分离。不正当的纺锤体组装会直接导致染色体的分离错误或失败,造成遗传的不稳定性,从而导致细胞死亡或癌症的发生。纺锤体是一个复杂的分子机器,单靠微管及结合的马达分子并不能很好解释它的所有功能和行为。“纺锤体基质”被认为是独立于微管存在的,能帮助纺锤体组装及行使功能的多分子基质。虽然这个概念已经提出了几十年,但它的具体成分仍不为人们所知。   非洲爪蟾卵抽提物体外组装纺锤体的方法对于研究和分离纺锤体基质起了很大作用。利用这套系统,美国卡耐基研究所郑诣先教授实验室的Ming-Ying Tsai等人发现细胞核核纤层蛋白lamin B是纺锤体基质的一个重要成分。   为了检验我们实验室长期研究的Nudel和胞质动力蛋白dynein是否也为纺锤体基质成分及其在有丝分裂纺锤体组装中的功能,我们与郑教授实验室开展合作,通过进一步优化这种体外组装系统,分离到了大量的纺锤体基质。经质谱及其他一系列生化、细胞学分析,最终确定Nudel和dynein也是纺锤体基质中的成分。干扰Nudel或dynein都能影响纺锤体的正常组装,且这种作用与它们在动粒(kinetochore)上的定位和功能无关。更为重要的是,Nudel可以与lamin B直接相互作用,在dynein存在的情况下,调控lamin B蛋白在微管结构上的富集。去除lamin B仍然可以形成富含Nudel及dynein的纺锤体基质,但如果破坏Nudel或dynein的功能则几乎使含lamin B的纺锤体基质消失,提示了在纺锤体基质中Nudel和dynein可能处于lamin B的上游。在纺锤体组装时,lamin B蛋白的缺失可导致纺锤体及其极点的紊乱,而Nudel或dynein受到干扰时,则会使所有的纺锤体极点都无法会聚。因此,我们认为Nudel和dynein可以通过调控含有laminB的纺锤体基质组装来影响有丝分裂纺锤体的形成。   此外,分离的纺锤体基质中还含有参与纺锤体组装、信号转导、转录调控、和膜运输等功能的约600多个蛋白质,提示我们这种纺锤体基质很有可能作为细胞分裂时物质分配的脚手架来影响细胞命运。
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