目的：本实验选取皮肤结构中几种常见细胞为研究对象，用慢病毒载体转染这些细胞，以探究慢病毒载体合适的转染条件、转染效率及转染对细胞活力的影响等问题。 方法：培养3种细胞：成纤维细胞、脂肪前体细胞、血管内皮细胞，分3部分进行实验。1)用MOI(感染复数)=10，20，50，100的LV-eGFP(携带绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体)转染上述细胞；转染后1周内于荧光显微镜下观察GFP表达情况，从而判断慢病毒载体转染目的细胞所需的合适MOI值及GFP表达时间等；此外，还比较了加polybrene组与不加polybrene组之间GFP表达的差异；2)在确定了LV载体转染目的细胞合适的MOI值后，以此条件进行目的细胞转染，在转染后不同时间，通过FACS(荧光激活细胞分选术)检测转染效率；3)设置转染组及对照组，分别以MTT(甲基噻唑基四唑)法及台盼蓝染色活细胞计数法来检测慢病毒载体转染后两组之间细胞活力的差别，以探讨慢病毒载体转染对目的细胞活力的影响。 结果：1)荧光显微镜观察结果：a)对于实验中的3种细胞，GFP表达随MOI值的增大而变强。其中MOI=20时GFP表达已比较满意。b)总体上，LV-eGFP转染细胞4天后GFP表达已接近高峰。c)加polybrene组GFP表达要好于未加polybrene组，对于脂肪前体细胞和血管内皮细胞尤为明显。2)FACS检测结果：转染后4天，3种细胞的转染效率都在50％以上，1周时效率较4天时变化不大，3周时转染效率仍比较高。3)MTT法、台盼蓝染色细胞计数结果：经统计分析，转染组与对照组之间，细胞的活力无明显差别。 结论：通过本实验掌握了慢病毒载体转染目的细胞相关的实验方法。对于本实验的3种细胞，MOI=20比较合适，已能达到有效转染；转染后4天GFP表达己接近高峰；polybrene对转染有增强作用。另外，经FACS检测，认为慢病毒的转染效率是比较高的，而且目的基因的表达能持续较长时间。最后，本实验证实了慢病毒载体转染对于目的细胞的活力无明显影响。